بررسی اثرات ضد سرطانی لاکتوباسیل های جداسازی شده از لبنیات سنتی آذربایجان، بر سلول های سرطان کلورکتال HCT ۱۱۶
/میترا ربیعی
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۵
، میرزائی
چاپی
کارشناسی ارشد
زیست شناسی - میکروبیولوژی
۱۳۹۵/۱۱/۲۰
تبریز
با علاقه رو به رشد به مراقبت از خود، به رسمیت شناختن ارتباط بین رژیم غذایی و سلامتی قوی تر می شود .امروزه بسیاری از جنبه های رژیم غذایی و محصولات بهداشتی طبیعی، توجه دانشمندان را به خود جلب کرده اند .یکی از این موارد" پروبیوتیک ها "هستند .در میان مواد غذایی کاربردی، استفاده از پروبیوتیک ها به سرعت در حال گسترش است .پروبیوتیک ها به عنوان" میکروارگانیسم های زنده "ای تعریف می شوند که هنگامی که در مقادیر کافی مصرف شوند، برای فرد سودمند هستند .پروبیوتیک ها می توانند باکتری، کپک یا مخمر باشند اما اکثر آنها باکتری هستند .در میان باکتری های پروبیوتیک،" باکتری های لاکتیک اسید "محبوب تر بوده و اکثر پروبیوتیک ها متعلق به این گروه می باشند .با توجه به تعداد بالای باکتری های پروبیوتیک در روده، به نظر می رسد پروبیوتیک ها یکی از جالب ترین نامزدها برای درمان سرطان کلورکتال باشند .از لحاظ خواص مفید بویژه اثر ضد سرطانی، مهم ترین و رایج ترین جنس باکتری های لاکتیک اسید در مواد غذایی تخمیری بویژه لبنیات، لاکتوباسیل ها هستند .لاکتوباسیل ها" عموما سالم شناخته شده "هستند چرا که جزئی از فلور طبیعی دستگاه گوارش می باشند .برخی گونه های لاکتوباسیلوس با محصولات تخمیری خود می توانند خطرات ناشی از انواع خاصی از سرطان ها را کاهش دهند و مانع از رشد تومور در سنجش های آزمایشگاهی، مطالعات حیوانی، مطالعات انسانی و مطالعات اپیدمیولوژیک شوند .مطالعات نشان می دهند که سلول کامل، سلول های کشته شده با حرارت، دیواره ی سلولی و پپتیدوگلیکان، سیتوپلاسم و اجزای سیتوپلاسمی، DNA ژنومی و دیگر اجزای سلولی لاکتوباسیل ها مانند پلی ساکارید و گلیکوپروتئین و همچنین محصولات تخمیری آنها می توانند مانع از رشد سلول های سرطانی شوند .هدف از این تحقیق، جداسازی و شناسایی جدایه های جدیدی از لاکتوباسیل های لبنیات سنتی رایج منطقه ی آذربایجان، و بررسی وجود و میزان اثر ضدسرطانی متابولیت های حاصل آنها بر روی سلول های سرطان کلورکتال HCT۱۱۶ است .در این پروژه پس از جمع آوری مواد لبنی سنتی، چندین جدایه از لاکتوباسیل ها جداسازی شد .تست های بیوشیمیایی و مولکولی به منظور شناسایی جدایه ها در سطح گونه انجام گرفت .متابولیت گیری از لاکتوباسیل ها صورت گرفت و پس از کشت سلول های سرطانی، اثرات ضد سرطانی متابولیت ها بر روی سلول هایHCT۱۱۶ ، توسط تست های سلولیMTT ، میکروسکوپ فلوروسنس و cell cycle مورد بررسی قرار گرفت .طی این پروژه اثر ضدسرطانی متابولیت های موجود در سوپرناتانت لاکتوباسیل های جداسازی شده مورد بررسی قرار گرفت .اثر سایتوتوکسیک این مواد به خوبی ملاحظه شد .گفته می شود فعالیت ضد تکثیری باکتری های لاکتیک اسید در برابر رشد سلول های توموری وابسته به غلظت و زمان است .باکتری های لاکتیک اسید ممکن است با توجه به سابقه طولانی خود در مصرف، مواد تشکیل دهنده فعالی در زمینه ی غذاهای عملکردی ایمن داشته باشند
ministered in adequate amounts, confer health benefits on the host. Probiotics can be bacteria, moulds, yeast. But most probiotics are bacteria. Among bacteria, lactic acid bacteria are more popular, and most probiotics belong to this group. Due to the large quantitities of probiotic bacteria in the gut, probiotics seems to be one of the most interesting candidates for the treatment of colorectal cancer. In terms of useful properties, especially anti-cancer effects, the most important and most common genera lactic acid bacteria in fermented foods, particularly dairy products, are lactobacilli. Lactobacilli belong to lactic acid bacteria and are generally recognized as safe because they are the habitant of normal microflora of Gastric Intestinal tract. Some strains of lactobacilli and their fermented products could reduce the risks of certain types of cancer and inhibit the growth of certain tumors in vitro assays, animal studies, human studies, epidemiological and intervention studies. Previous reported live whole cells, the heat-killed cells, cell walls, cytoplasm, genomic DNA and other cellular components of lactobacillus as well as their fermented products could inhibit the growth of cancer cells. The aim of this study is to isolate and identify new strains of lactobacilli of Azerbaijan region traditional dairy products, and evaluation of Anticancer Activities of Cell Extract of this Isolated strains on HTC۱۱۶ Colorectal Tumor Cells. In this project, after collecting traditional dairy products, several strains of lactobacilli were isolated. Molecular and biochemical testing for species-level identification of isolates was performed.Metabolites of lactobacilli were obtained. After cancer cells culturevation, anticancer effects of metabolites on HCT۱۱۶ cells, evaluated by by MTT assay, fluorescent microscope test and cell cycle assay. The cytotoxic effects of these compounds observed well. The antiproliferative activity of lactic acid bacteria against the growth of tumor cells might be dose and time-dependent. Lactic acid bacteria may due to long history of use, has have the active ingredients in the field of functional safe foodsصWith the growing interest in self-care, recognition of the link between diet and health has never been stronger. Today, many of the dietary agents and natural health products have attracted the attention of scientists. One of them is probiotics. Within the functional foods, the use of probiotics is rapidly expanding. Probiotics are defined as "live microorganisms" that, when ad