تأثیر افزودن عصاره گیاه نسترن و اسیدآسکوربیک به عنوان آنتیاکسیدانهای طبیعی و سنتتیک بر فرایند انجماد/یخ گشایی منی قوچ
/سمیرا رضویان
: کشاورزی
، ۱۳۹۴
چاپی
کارشناسی ارشد
علوم دامی گرایش فیزیولوژی دام
۱۳۹۴/۱۱/۲۸
تبریز
یکی از علل کاهش توان باروری اسپرم، تولید بیش از حد رادیکالهای آزاد طی فرآیند انجماد-یخ گشایی میباشد .رادیکالهای آزاد با تخریب و عبور از غشای اسپرم میتوانند به اندامکهای درونی اسپرم دسترسی پیدا کرده و سبب مرگ اسپرم شوند .گیاه نسترن دارای مقادیر بالایی از ترکیبات فنولی از جمله کوئرسیتین، الاگیک اسید و کامفرول میباشد .آسکوربیک اسید نیز عمدهترین آنتیاکسیدان محلول در آب است که به عنوان یک جاروب کننده برای طیف وسیعی از رادیکالهای آزاد عمل میکند .هدف این مطالعه بررسی اثر آنتیاکسیدانی سطوح مختلف عصاره گیاه نسترن(۱۰۰ ،۱۵۰ ، ۲۰۰) میکرولیتر در میلی لیتر و آسکوربیک اسید(۵/۰ ،۱ ،۵/۱ ، ۲) میلیگرم بر میلی لیتر در رقیق کننده بر پایه تریس-زرده تخم مرغ میباشد .نمونههای منی از پنج رأس قوچ قزل که تحت شرایط تغذیهای یکسانی نگهداری میشدند هفتهای دو بار و توسط واژن مصنوعی گرفته شده و بلافاصله به آزمایشگاه منتقل گردیده و در حمام آب گرم C۳۴قرار داده شدند .پس از مخلوط کردن نمونههای منی، به منظور حذف اثرات فردی، با رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ به همراه سطوح مختلف عصاره نسترن و آسکوربیک اسید رقیق، تا دمایC ۴سردسازی شدند .سپس نمونههای منی در پایوتهای ۲۵/۰ میلی لیتری پر شدند و پس از طی مراحل انجماد تا زمان ارزیابی در داخل تانک ازت نگهداری شدند .پس از یخ گشایی پارامترهای تحرک اسپرم بوسیلهی سیستمCASA ، زندهمانی با رنگ آمیزی حیاتی ائوزین-نیگروزین، تست یکپارچگی غشا با محلول هیپواسموتیک، مورفولوژی اسپرم با استفاده از محلول هانکوک و فرآیند لیپید پراکسیداسیون با اندازهگیری غلظت مالون دی آلدهید ارزیابی شدند .دادههای بدست آمده برای صفات مورد ارزیابی در قالب طرح کاملا تصادفی نامتعادل و با استفاده از نرم افزارSAS (۹ ،۱، ۳)به کمک رویه GLM آنالیز شدند .نتایج نشان داد که افزودن سطوح۱۵۰ L/mLاز عصاره نسترن و mg/mL۵/۱ از آسکوربیک اسید بر رقیق کننده تریس-زرده تخم مرغ، بهترین اثر محافظتی را روی اسپرم یخ گشایی شده قوچ قزل داشت
Extra producing of free radicals during various stages of freezing-thawing process is one of the factors that reduce fertility of sperm. Free radicals by destruction sperm membrane can access to internal organs and cause sperm death. Rosa canina has Large amounts of phenolic compounds such as quercetin, ellagic acid and kaempferol. Also, Ascorbic Acid is The most common water-soluble antioxidant that acts for a wide range of ROS.e as a scavenger.The aim of this study was to investigate the antioxidant effects of different levels of Rosa canina extract (0, 100, 150, 200 L/ml) and Ascorbic Acid (0. 0.5, 1, 1.5, 2 mg/ml) in tris-yolk based dissolvents. Semen samples were collected using an artificial vagina, twice a week from five Ghezel ram which kept in identical nutritional conditions. The samples was transferring to the laboratory, just after samplings and were kept within warm water with a 34 C. In order to eliminate the individual effects of rams, the semen samples were pooled together and diluted with tris- egg yolk extender that contain different concentration of Rosa canina extract and Ascorbic Acid and were cooled to 4C. The samples were filled in 0.25ml straws and after passing freezing stages, they were stored in nitrogen tank until evaluation. After thawing, the sperm motility parameters, viability of sperms, membrane integrity, sperm abnormalities and lipid peroxidation were evaluated using CASA system, eosine-nigrosin stain, hypo osmotic swelling test, hancock solution and measuring of malondialdehyde concentration, respectively. Data were analyzed using GLM procedure of SAS software (9.1.3). Results showed that adding 150 mg/mL Rosa canina extract or 1.5 mg/mL Ascorbic Acid to tris-egg yolk dissolvent has been the best protective effect on cryopreserved sperm of Ghezel ram semens(P<0.05)