۱۶۲۴۶پ
per
جداسازی و غربالگری اکتینومیست‌صهای مولد متابولیت ثانویه موثر بر دو رده سلول سرطانی NB۴ وK۵۶۲ لوکمی انسانی
/کامران حسینی
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۵
، راشدی
چاپی
کارشناسی ارشد
میکروبیولوژی
۱۳۹۵/۱۱/۱۸
تبریز
اکتینوباکتری‌صها شاخه ای از باکتری‌صهای گرم مثبت، هتروتروف) شیمیوارگانوتروف(، میله ای شکل، هوازی، غیر متحرک، با رشته‌صهای منشعب و اسپور غیر جنسی بوده و اغلب دارای متابولیسم هوازی اجباری می‌صباشند .محتوای بازهای نیتروژن دار، سیتوزین و گوانین، در DNA اغلب اکتینومیست‌صها، بیشتر از سایر باکتری‌صها و اغلب در محدوده۶۳ - ۷۸است .رده اکتینوباکتری‌صها به پنج راسته تقسیم می‌صشوند که از این میان راسته استرپتومایسس‌صها غالب‌صترین هستند .اکتینوباکتری‌صها را می‌صتوان به وسیله ویژگی‌صهای فیزیولوژیکی و مورفولوژیکی، ترکیب شیمیایی دیواره سلولی، نوع پپتیدوگلیکان، فسفولیپیدها، زنجیره‌صهای اسید چرب، درصدC+ G، آنالیز ۱۶S rRNA و هیبریداسیونDNA - DNAتشخیص داد .محصولات ثانویه باکتریایی منبع بسیار غنی برای ترکیبات جدید با فعالیت‌صهای بیولوژیک مختلف می‌صباشند .ساختار شیمیایی این ترکیبات متفاوت و پیچیده بوده و اغلب فعالیت‌صهای ویژه ای در سیستم‌صهای مختلف بیولوژیک ارائه می نمایند .جنس‌صهای اکتینومیست‌صها به ویژه استرپتومایسس‌صها تولید کننده بیش از نیمی از متابولیت‌صهای فعال زیستی از جمله ترکیبات ضد سرطان می‌صباشند .لوکمی میلوئیدی بیماری بدخیم مربوط به تکثیر سلول‌صهای بنیادی خونساز است که با افزایش تعداد سلول‌صهای میلوئیدی در خون محیطی و نیز در استخوان همراه است .یکی از اولویت‌صهای اصلی تحقیقات، یافتن ترکیباتی با خاصیت سمیت سلولی و افزایش دهندگی آپاپتوز است لذا، اهمیت تحقیق حاضر بررسی اثرات مهاری رشد و القاء آپاپتوز متابولیت‌صهای تولید شده توسط باکتری‌صهای خانواده اکتینومیست بر روی رده‌صهای سلول سرطانی K۵۶۲ و NB۴ می باشد .در این مطالعه از بین اکتینومیست‌صهای جداسازی شده (۲۲ جنس(، اثرات ضد سرطانی متابولیت‌صهای ثانویه باکتری peucetius Streptomyces در رده‌صهای سلولی K۵۶۲ لوکمی میلوئیدی مزمن وNB۴ لوکمی پرومیلوسیتیک حاد مورد بررسی قرار گرفت .به این منظور سلول‌صهایK۵۶۲ وNB۴ با غلظت‌صهای مختلف متابولیت‌صها و برای مدت زمان۲۴ ، ۴۸ و ۷۲ ساعت تیمار گردیدند .از آزمون دفع رنگ تریپان بلو برای بررسی اثرات مهار رشدی متابولیت‌صها استفاده شد .به منظور بررسی اثرات آپاپتوزی متابولیت‌صها از آزمون فلورسنت و فلوسایتومتری) چرخه سلولی (استفاده گردید .نتایج حاصل، نشان داد که متابولیت‌صهای محلول در اتیل استات باکتری peucetius Streptomyces باعث مهار رشد در یک روش وابسته به زمان و دوز بر روی سلول‌صهایK۵۶۲ وNB۴ می‌صگردد .با توجه به اثرات مهار رشد و آپاپتوز توسط متابولیت حاصل از این باکتری، این متابولیت را می‌صتوان به عنوان ترکیبی جدید و موثر برای مطالعه بیشتر در درمان بیماران مبتلاء به لوکمی پیشنهاد نمود
Actinobacteria is branch of Gram-positive, filamentous heterotrophic (Chemoheterotroph), rod-shaped, aerobic, immobile bacteria, asexual spores with obligate aerobic metabolism. The cytosine and guanine content in DNA of Actinobacteria is higher than other bacteria, around 63-78 . Class Actinobacteria has five orders among which is the most dominant the order Streptomyces. Actinobacteria can by physiologically and morphologically characteristics, the chemical composition of the cell wall, peptidoglycan type, phospholipids, fatty acid chains, the percentage of G+C, 16S rRNA analysis and DNA-DNA hybridization were diagnosed. Secondary bacterial products are a terrific source for new compounds with biological activity factors are high. These structure are complex and different chemically and provide special activities in different biologic systems most of the times. The genus of actinomycetes specially streptomycetes are producers of more than half active metabolites in biology like anti cancerous mixtures. Myelogenous leukemia cells malignant disease associated with the proliferation of myeloid progenitor cells in peripheral blood by increasing the number and the associated bone. Therefore one of the research preferences is to find mixtures with Cytotoxicity and increasingapoptosis thenthe importance of these suppressing effects is to grow apoptosis metaboiltes produced by bacteria in actinomycets Family on cancerous cells K562 and NB4. In this study, Among members of the genus isolated Actinomycetes (22 genera), anti-cancer effects of secondary metabolites of bacteria of genus Streptomyces peucetius in chronic myelogenous leukemia cell line K562 and NB4 acute promyelocytic leukemia were studied. For this purpose, K562 and NB4 cells with various concentrations of metabolites and for a period of 24, 48 and 72 hours were treated. Trypan blue exclusion test was used to evaluate growth inhibitory Metabolites.To evaluate the metabolites Apoptotic effects, Fluorescent and Flowcytometry tests (cell cycle) was used. The results of the study showed that the metabolites dissolved in ethyl acetate inhibits the growth of bacteria Streptomyces peucetius dose-dependent and time in K562 and NB4 cells in throughput. With respect to growth inhibition and apoptosis effects of metabolites produced by this bacteria, these metabolites can as a new and effective combination in the treatment of patients with leukemia proposed for further study
حسینی، کامران
زرینی، غلامرضا، استاد راهنما
مهدوی، مجید، استاد راهنما
حسینپور فیضی، محمدعلی، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
