بررسی اثر کامپوزیت زئولیت-نانوکیتوزان بر ساختار هیستولوژیک و استریولوژیک نواحی مختلف روده در ماهی قزلصآلای رنگین کمانOncorhynchus mykiss))
/خدیجه زیرک
: دامپزشکی
، ۱۳۹۵
چاپی
کارشناسی ارشد
بافت شناسی گرایش دامپزشکی
۱۳۹۵/۱۱/۱۹
تبریز
امروزه بکارگیری نانو ذرات در جیره غذایی آبزیان به دلیل افزایش رشد، تقویت سیستم ایمنی و بهبود ضریب تبدیل بسیار مورد توجه قرار گرفته است .در کل افزایش رشد متعاقب استفاده از این ترکیبات به دلایل مختلفی مانند کاهش جمعیت باکتریصهای بیماریصزا و افزایش باکتریصهای مفید، بهبود فعالیت و ساختار روده و متعاقب آن افزایش قابلیت جذب و یا افزایش فعالیت آنزیمصهای گوارشی در ماهی روی میصدهد .لذا مطالعه حاضر با هدف بررسی اثرات کامپوزیت زئولیت/نانوکیتوزان بر ساختار هیستولوژیک و استریولوژیک نواحی مختلف روده در ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) صورت گرفت .در این مطالعه ۴۸۰ قطعه بچه ماهی قزلصآلای رنگین کمان با میانگین وزنی ۵۰ گرم به صورت کاملا تصادفی به ۸ گروه با سه تکرار در ۲۴ تانک تقسیم شده و به مدت ۶۰ روز تحت تیمار قرار گرفتند به نحوی که گروه کنترل فقط جیره پایه را دریافت کرد .در گروهT۱ ، ۲۸/۱۴ گرم زئولیت به هر کیلوگرم جیره پایه اضافه شد .در گروهصهایT۲ ، T۳ و T۴ علاوه بر زئولیت به ترتیب۰۵/۰ ، ۵/۰ و ۵ گرم کیتوزان نیز به هر کیلوگرم جیره پایه اضافه گردید در حالی که در گروهصهایT۵ ، T۶ و T۷ علاوه بر زئولیت به ترتیب۰۵/۰ ، ۵/۰ و ۵ گرم نانوکیتوزان به هر کیلوگرم جیره پایه اضافه شد .در پایان دوره از هر گروه ۵ ماهی به صورت کاملا تصادفی انتخاب و پس از تشریح و خروج رودهص، از نواحی مختلف آن شامل قسمتصهای قدامی، میانی و خلفی نمونه گیری به عمل آمده و پس از تهیه برشصهای بافتی به روش استاندارد و معمول تهیه مقاطع پارافینی، مورد ارزیابی هیستولوژیک، هیستوشیمی، هیستومورفومتری و استریولوژیک قرار گرفت .در نهایت دادهصها جهت مقایسه بین گروهصها با آزمون آنالیز واریانس یک طرفه و پس آزمون توکی مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفتند .نتایج مطالعات هیستولوژیک نشان داد که ساختار کلی بافت روده قدامی در تمامی گروهصهای تیمار کاملا طبیعی بود اما در روده میانی در گروهصهای T۱ و T۴ تخریب جزئی بخشصهایی از بافت پوششی و به هم ریختگی جزئی ساختار پرزها قابل مشاهده بود .در روده خلفی نیز ساختار کلی بافت روده در همه گروهصها طبیعی بود فقط افزایش بافت لنفوئیدی در طبقه مخاطی بالاخص در گروه T۴ قابل توجه بود .نتایج مطالعات هیستوشیمی نیز مشخص نمود که جمعیت نسبی سلولصهای جامی شکل بر اساس ماهیت موسین ترشحی در نواحی مختلف روده تحت تأثیر تیمارهای مورد مطالعه دچار تغییرات مشخص و معنی داری میصشود .نتایج مطالعات هیستومورفومتریک و استریولوژیک مبین آن است که استفاده از کامپوزیت زئولیت-نانوکیتوزان باعث بهبود بیشتر شاخصصهای هیستومورفومتریک و استریولوژیک روده اعم از ارتفاع پرزها، افزایش سطح جذب، تعداد سلولصهای جامی شکل و جمعیت لنفوسیتصهای داخل بافت پوششی در نواحی مختلف روده به صورت وابسته به دوز در مقایسه با اضافه نمودن زئولیت وکامپوزیت زئولیت-کیتوزان دارد .(>(۰۵/۰p در مجموع بر اساس نتایج مطالعه حاضر میصتوان گفت که استفاده از کامپوزیت زئولیت-نانوکیتوزان میصتواند با بهبود خصوصیات هیستومورفومتریک بافت روده تأثیر مثبتی بر فعالیت و قابلیت جذب و متعاقب آن افزایش رشد در ماهی قزلصآلای رنگین کمان شود
Today, the use of nanoparticles is highly regarded in fish diets due to growth performance, immune response and conversion efficiency increasing. Overall, improved growth rate occurs following the use of these compounds for various reasons such as decreasing in the population of pathogenic bacteria and increasing in beneficial gut microbiota, increasing in absorption due to improvement of activity and morphological structure of intestine and increasing in digestive enzymes activity. Therefore, this study was conducted to evaluate the effect of zeolite-nanochitosan composite on histological and stereological structure of different regions of intestine in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). In this study, 480 juvenile rainbow trout with average weight of 50 g were randomly divided into 8 groups with three replications in 24 tanks including control group received the basal diet, group T1 received 14.28 g zeolite per kg basal diet, groups T2, T3 and T4 received 0.05, 0.5 and 5 g chitosan addition to zeolite per kg basal diet, respectively as well as group T5, T6 and T7 received 0.05, 0.5 and 5 g nanochitosan addition to zeolite per kg basal diet, respectively and were treated for 60 days. At the end of experiment, five fish from each group were randomly selected and after dissection, the whole of intestine was removed and tissue sampling from different regions of intestine including anterior, middle and posterior parts of intestine fixed in buffered formalin 10 , processed by standard and routine paraffin embedding. Sections were stained by H&E and PAS-AB and were evaluated by histological, histochemichal and stereological studies. Finally, one-way ANOVA and Tukey's post hoc test were performed to statistical analysis for comparison between groups. Histological results showed that general structure of anterior intestine has normal architecture in all treatment groups but middle part of intestine in groups T1 and T4 have partial destruction in epithelium and villi structure. General structure of posterior intestine has also normal architecture in all groups. A noticeable increase in lymphoid tissue of tunica mucosa was observed especially in group T4. Histochemical results also revealed that treatments altered relative population of goblet cells based on nature of secreting mucin significantly. Histomorphometrical and stereological results indicated that the use of zeolite-nanochitosan composite improved the most histomorphometrical and stereological index of intestine including villi height, absortive surface area, the number of goblet cells and intraepithelial lymphocytes in different regions of intestine in a dose dependent manner compared to zeolite and zeolite-chitosan composite (p<0.05). Finally, based on results of this study, it can be concluded that the use of zeolite-nanochitosan composite can improve histomorphometrical properties of intestine and increase activity and absorptive ability due to growth performance in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss