تشخیص مولکولی گونه های سارکوسیست در گاوهای کشتارشده در کشتارگاه تبریز به روشspecific-PCR Allele
/ثنا غفاری
: دامپزشکی
، ۱۳۹۵
، راشدی
چاپی
کارشناسی ارشد
دکتری حرفه ای
۱۳۹۵/۰۶/۱۷
تبریز
گونهصهای سارکوسیست انگلصهای تکصیاختهصای تشکیل دهنده کیست در عضلات حیوانات اهلی در سراسر جهان هستند .در این میان برخی گونهصها دارای اهمیت زئونوتیک نیز هستند .برای جنس سارکوسیست حدود ۱۳۰ گونه شناخته شده است که تفاوتصهایی در چرخهصی زندگی و بیماریصزایی دارند .تاکنون در گاو ۳ گونه سارکوسیست شناسایی شده که کیستصهای ماکروسکوپی و میکروسکوپی در عضلات گاو تشکیل میصدهند .تشکیل کیستصهای ماکروسکوپیک از نظر حذف قسمتصهای آلوده لاشه منجر به ضرر اقتصادی شده و در مورد گونهصهای تشکیل دهندهصی کیستصهای میکروسکوپیک بیماریصزایی آنصها به صورت سقط جنین و مرگصومیر حائز اهمیت است .گونهصهای سارکوسیست از جمله گونهصهای سارکوسیست در گاو و گاومیش برای میزبانصهای واسط خود اختصاصی هستند .اما گونهصهای سارکوسیستیس هیرسوتا، سارکوسیستیس کروزی و سارکوسیستیس هومینیس که میزبان اختصاصی آن ها گاو است، به صورت متقاطع در گاومیش نیز گزارش کردهصاند .از آنجا که در آذربایجان شرقی گاو و گاومیش هر دو وجود دارد احتمال آلودگی متقاطع به گونهصهای سارکوسیست بایستی بررسی شود .تاکنون در بررسیصها گزارشی مبنی بر وجود آلودگی متقاطع به گونهصی سارکوسیستیس فوزی فورمیس در گاو وجود ندارد .ولی از آنجا که این گونه شباهت ژنتیکی زیادی به گونه سارکوسیستیس هیرسوتا در گاو دارد لذا برای اولین بار در این بررسی سه پرایمر اختصاصی تحت عنوان روشspecific - Alleleطراحی شده و برای تشخیص دو گونه سارکوسیستیس فوزی فورمیس و سارکوسیستیس هیرسوتا در گاو استفاده صشد .در این بررسی ۳۰ نمونه از عضلات سه سر بازو، مری، قلب، دیافراگم و عضلات بین دندهصای از گاوهای کشتار شده در کشتارگاه صنعتی تبریز طی یک دورهصی دو ماهه از مهر تا آذر ۱۳۹۴ جمعصآوری شده و به روش هضمی و رنگصآمیزی گیمسا وجود برادیصزوئیتصهای انگل با میکروسکوپ نوری مورد بررسی قرار گرفت که همه نمونه ها در این مرحله مثبت بودند .نتایج بررسی مولکولی نشان داد که میزان آلودگی به گونهصی سارکوسیستیس هیرسوتا ۳۳/۹۳ بوده است .همچنین آلودگی به گونهصی سارکوسیستیس فوزی فورمیس مشاهده نشد .این یافتهصها نشان دادکه انتقال متقاطع سارکوسیستیس فوزی فورمیس بین گاومیش وگاو وجود ندارد .این نتیجه برای نخستین بار در مورد گونه سارکوسیستیس فوزی فورمیس در گاو گزارش شده و اولین بار است که بررسی در مورد انتقال متقاطع سارکوسیست به روشspecific - Alleleصورت گرفته است
Sarcocystis species of protozoan parasites caused cysts in the muscles of animals throughout the world. Some of these species are important in zoonotic diseases. There are approximately 130 species with differences in the life cycle and pathogenicity in the genus Sarcocystis. Until now, three species have been identified in cows that formed macroscopic and microscopic cysts in muscular tissues. Take out of the macroscopic cysts from the infected muscle, leading to economic losses. Moreover, some microscopic cysts are pathogenic factors for inducing abortion and mortality in the herd. Sacocystis species have specific intermediate hosts among in cow and buffalo. However, Sarcocystis hirsuta, Sarcocystis cruzi and Sarcocystis hominis species which are known as specific intermediate host in cow, it was reported these species have observed as cross-contamination in buffalo also. Since there are both cow and buffalo in Eastern Azerbaijan so the possibility of cross-contamination of Sarcocystis species must be investigated. Regard to latest studies, there is any report of cross-contamination of Sarcocystis fusiformis in cow. Because of Sarcocystis fusiformis has high genetic similarity to Sarcocystis hirsuta, for the first time; in this study three specific primers as Allele-specific method were designed and used to detection Sarcocystis hirsuta and Sarcocystis fusiformis from together in the cow. Tissue specimens from intercostal muscle, diaphragm, esophagus, heart, and triceps muscles were recovered from 30 cows slaughtered at Tabriz slaughterhouse at Eastern Azerbaijan Province during two months period between October 2015 and December 2015. The samples were examined by the digestion method and giemsa staining for detection of Sarcocystis bradyzoite by light microscope. All of the studied samples were positive. Result of molecular study was shown that 93/33 of samples were infected to Sarcocystis hirsuta. Also, Sarcocystis fusiformis it was not found. These findings indicated that there is no cross-contamination of Sarcocystis fusiformis between buffalo and cow. This result has reported for the first time about Sarcocystis fusiformis in cow and this study for the first time has accomplished about Sarcocystis spp. cross-contamination by Allele-specific method