شناسایی عوامل باکتریایی بیماری چوب مرطوب روی درختان نارون در شهر تبریز
/مهرداد علیزاده
: کشاورزی
، ۱۳۹۵
، باقری
چاپی
کارشناسی ارشد
بیماریشناسی گیاهی
۱۳۹۵/۰۶/۱۷
تبریز
درختان نارون با نام علمی .Ulmus spp دارای ارزش اقتصادی بالا بوده و از جمله درختان زینتی هستند که در پارکها و خیابان-ها مورد استفاده قرار میصگیرند .ایران یکی از کشورهایی است که برخی گونهصهای نارون در آن بصورت بومی گسترش یافتهصاند، هرچند نقشهصی دقیقی از تنوع و پراکندگی آنها در دسترس نیست .بیماری چوب مرطوب یکی از معضلات بسیار مهم روی درختان نارون در شمالغرب ایران و سایر مناطق در دنیا است که سالیانه خسارتصهای زیادی را متوجه درختان نارون میصکند .اهمیت این بیماری میصتواند در کاهش طول عمر درخت و مستعد کردن درخت به حملهصی عوامل ثانوی و فرصت طلب منعکس شود .با وجودگزارشات متعدد از خسارتصهای اقتصادی ناشی از بیماری در شهر تبریز، متاسفانه تاکنون عوامل دخیل در ایجاد این بیماری بطور دقیق شناسایی نشدهصاند .هدف مطالعه حاضر شناسایی عامل یا عوامل باکتریایی ایجاد کننده بیماری در این شهر میصباشد .به منظور شناسایی عامل اصلی این بیماری در این شهر، طی دو سال۱۳۹۴) - (۱۳۹۳از مناطق آلودهصی شهر تبریز بازدید به عمل آمده و نمونهصهایی از شاخهصهای دارای علائم چوب مرطوب برداشته و به آزمایشگاه منتقل گردیدند .پس از کشت و جداسازی باکتریصها، ۹۲ جدایه باکتریایی از بافتصهای آلودهصی درخت نارون در شهر تبریز خالص سازی شدند .براساس آزمون فوق حساسیت روی توتون و تست بیماریزایی روی شاخهصهای بریده شده نارون، جدایهصهای بیماریزا چکیده :درختان نارون با نام علمی .Ulmus spp دارای ارزش اقتصادی بالا بوده و از جمله درختان زینتی هستند که در پارکها و خیابانصها مورد استفاده قرار میصگیرند .ایران یکی از کشورهایی است که برخی گونهصهای نارون در آن بصورت بومی گسترش یافتهصاند، هرچند نقشهصی دقیقی از تنوع و پراکندگی آنها در دسترس نیست .بیماری چوب مرطوب یکی از معضلات بسیار مهم روی درختان نارون در شمالغرب ایران و سایر مناطق در دنیا است که سالیانه خسارتصهای زیادی را متوجه درختان نارون می-کند .اهمیت این بیماری میصتواند در کاهش طول عمر درخت و مستعد کردن درخت به حملهصی عوامل ثانوی و فرصت طلب منعکس شود .با وجودگزارشات متعدد از خسارتصهای اقتصادی ناشی از بیماری در شهر تبریز، متاسفانه تاکنون عوامل دخیل در ایجاد این بیماری بطور دقیق شناسایی نشدهصاند .هدف مطالعه حاضر شناسایی عامل یا عوامل باکتریایی ایجاد کننده بیماری در این شهر میصباشد .به منظور شناسایی عامل اصلی این بیماری در این شهر، طی دو سال۱۳۹۴) - (۱۳۹۳از مناطق آلودهصی شهر تبریز بازدید به عمل آمده و نمونهصهایی از شاخهصهای دارای علائم چوب مرطوب برداشته و به آزمایشگاه منتقل گردیدند .پس از کشت و جداسازی باکتریصها، ۹۲ جدایه باکتریایی از بافتصهای آلودهصی درخت نارون در شهر تبریز خالص سازی شدند .براساس آزمون فوق حساسیت روی توتون و تست بیماریزایی روی شاخهصهای بریده شده نارون، جدایهصهای بیماریزا باکتریایی مشخص گردیدند .آزمونصهای بیوشیمیایی گرم، پتاسیم هیدروکسید، کاتالاز، اکسیداز، سیترات، مالتوز، ساکارز، دیصمانیتول و لاکتوز برای جدایهصهای بیماریزا مورد استفاده قرار گرفتند .برای مطالعات مولکولی از آغازگرهای عمومی پروکاریوتصها (۲۷F و ۱۴۹۲R) استفاده شد .محصولات حاصل از PCR برای توالی یابی جدایه ها به شرکت پیشگام تهران ارسال گردید .بر اساس نتایج بدست آمده پنج گونه باکتریBrevundimonas bullata ،Paracoccua alcaliphilus ،P.marcusii ، Luteimonas aestuarii و Lelliottia nimipressuralis بعنوان باکتریصهای دخیل در بیماری چوب مرطوب از درختان نارون منطقه جداسازی و شناسایی گردیدند .نتایج بررسیصهای مولکولی با بررسیصهای بیوشیمیایی مطابقت داشتند .این اولین گزارش از وجود گونهصهای B. bullata ، P. alcaliphilus ، P. marcusii و L. aestuarii از روی نارون در ایران و اولین گزارش از وجود گونه ی L. nimipressuralis در شمالغرب کشور میصباشد .بر اساس آزمونهای بیماریزایی گونه L. nimipressuralis عامل اصلی بیماری چوب مرطوب در منطقه استان آذربایجان شرقی است .
P.marcusii, Luteimonas aestuarii from elm trees in the world. ، Paracoccus alcaliphilus ،P.marcusii, Luteimonas aestuarii and Lelliottia nimipressuralis. This is the first report of isolation of L. nimipressuralis in the Northwest from Iran and the first report of isolation of Brevundimonas bullata ، Paracoccus alcaliphilus ،Abstract The elm trees (Ulmus spp.) has a high economical importance and is one of the most widely used ornamental trees in the parks and streets. Iran is one of the countries that some species of elm have been widely distributed, but there is no the precise map about their numbers and diversity. Bacterial wetwood is one the most important diseases of elm trees in Northwest of Iran and in the other parts of the world with significant damages on this trees. The importance of this disease could be reflected in reduction of life expectancy of trees and susceptible to invasion of secondary agents. Despite economic losses due to this disease in the Tabriz city, there is no reliable and molecular report for main cause of this disease in the area. This study was conducted to identify the main bacterial causal agents of wetwood disease on elm in this region. During 2014-2016 years, various suspected samples with symptomatic tissues were collected from different orchards of elm trees and transferred to the Lab. In total, 92 bacteria strains were isolated from infected elm tissues. After isolation and purification, pathogenicity tests was performed on the young branches and and palnt pathogenic stains were selected. Using biochemical and physiological assays, the selected pathogenic strains were primarily identified. Polymerase chain reaction (PCR) with using universal primers 27F (5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3) and 1492R (5-TTCTCCGCTTATTGATATGC-3) primers was performed for molecular identification. The sequencing results were BLAST and compared with data bases in NCBI gene-bank, which indicating of relatedness of selected strains into Brevundimonas bullata