عنوان

بررسی برهمکنش آلودگی‌ای مخلوط ویروس موزاییک خیار و ویروس برگ باد بزنی مو در گیاهان آزمایشی,‮‭SB‬

‭۱۴۴۱۲پ‬

per

بررسی برهمکنش آلودگی‌ای مخلوط ویروس موزاییک خیار و ویروس برگ باد بزنی مو در گیاهان آزمایشی

‮‭SB‬

/وحید جوان مسجدلو

: کشاورزی

، ‮‭۱۳۹۴‬

، راشدی

چاپی

کاشناسی ارشد

بیماری شناسی گیاهی

‮‭۱۳۹۴/۰۹/۲۹‬

تبریز

آلودگی مخلوط گیاهان با بیش از یک ویروس، منجر به بروز انواع متفاوتی از برصصصصهمکنش بین ویروس-های آلوده کننده می‌صگردد .برصهمکنش دو ویروس بیمارگر، ویروس موزاییک خیار ‮‭(Cucumber mosaic virus, CMV)‬ و ویروس برگ‌ص‍ بادبزنی مو ‮‭(Grapevine fanleaf virus, GFLV)‬ برای اولین بار در دنیا روی هفت نوع گیاه آزمایشی‮‭(Nicotiana benthamiana‬ ،‮‭N.clevelandii‬ ،‮‭Chenopodium quinoa‬ ،‮‭C. amaranticolor‬ ،‮‭Gomphrena globosa‬ ، ‮‭Petunia hybrida‬ و ‮‭Cucurbita pepo)‬ مورد مطالعه و بررسی قرار گرفت .در ایران، آلودگی به هر یک از این دو ویروس بر روی گیاهان مختلف مشاهده شده‌صاند اما گزارشی مربوط به آلودگی مخلوط آنها وجود ندارد .به منظور مطالع‍ برصهمکنش ‮‭CMV‬و‮‭GFLV‬ ، پس از خالص‌صسازی ویروس‌صها، برای سهولت شناسائی آنها اقدام به آزمون الایزا گردید .جهت مطالع‍ رقابت نسبی و شدت علائم این دو ویروس در آلودگی مخلوط، یک طرح کاملا تصادفی با سه تکرار و پنج تیمار در شرایط گلخانه‌صای اعمال شد .این تیمارها شامل مایه‌صزنی مکانیکی گیاهان مورد آزمایش با آموده های ‮‭(۱)‬ :ابتدا ‮‭CMV‬ سپس‮‭GFLV‬ ، ‮‭(۲)‬ ابتدا ‮‭GFLV‬ بعد‮‭CMV‬ ، ‮‭(۳)‬ دو ویروس بطور همزمان ‮‭(۴)‬ فقط ‮‭CMV‬ و ‮‭(۵)‬ فقط ‮‭GFLV‬ بودند .از ‮‭۲‬ تا ‮‭۲۱‬ روز پس از مایه زنی، علائم ایجاد شده روی گیاهان آزمایشی ثبت شده و با آزمون الایزا مورد بررسی قرار گرفتند .میزان جذب نوری اندازه‌صگیری شده با دستگاه تشتک خوان الایزا در طول موج ‮‭۴۰۵‬ نانومتر، به عنوان شاخصی از غلظت نسبی ویروس در نظر گرفته شد و مورد تجزیه آماری با آزمون فاکتوریل و مقایسه با آزمون دانکن قرار گرفت .همچنین ‮‭RNA‬ کل از گیاهان آلوده استخراج و مورد بررسی با نسخه برداری معکوس واکنش زنجیره‌صای پلیمراز‮‭PCR) - (RT‬قرار داده شد) باندهای مورد انتظار با آغازگرهای اختصاصی در مورد ‮‭CMV‬ حدود ‮‭۸۷۰‬ و دربارة ‮‭GFLV‬ به اندازه ‮‭۱۵۱۲‬ جفت باز بود .(در تیمار با فقط ‮‭GFLV‬ در همه نمونه‌صها قطعه مورد نظر ‮‭(۱۵۱۲‬ جفت باز (مشاهده شد .در تیمار با دو ویروس بطور همزمان بجز قطعه مربوط به ‮‭CMV (۸۷۰‬ جفت باز (در ‮‭N. clevelandii‬ در همه نمونه‌صها قطعات مورد نظر ‮‭(CMV‬ با اندازة ‮‭۸۷۰‬ جفت باز و ‮‭GFLV‬ با ‮‭۱۵۱۲‬ جفت باز (مشاهده شد .در تیمار با فقط ‮‭CMV‬ در همه نمونه‌صها قطعه مورد نظر مشاهده گردید .در تیمارهای ‮‭C۱G۲‬ و ‮‭G۱C۲‬ قطعات مورد نظر مشاهده نگردید ولی قطعاتی ناخواسته‌ص‍ مشاهده شد که احتمالا ناشی از ناسازگاری دو جفت آغاز در مولتیپلکس پی‌صسی‌صآر بود .نتایج بر اساس میزان جذب نوری نشان داد که غلظت ‮‭CMV‬ در اغلب گیاهانی که با هر دو ویروس آلوده شده بودند نسبت به گیاهانی که با ‮‭CMV‬ به تنهایی آلوده شده بودند افزایش یافته بود .این نتیجه ممکن است بر وجود برهمکنش هم‌صافزایی یک‌صجانبه به نفع افزایش تکثیر ‮‭CMV‬ بین دو ویروس دلالت کند و بنابر این ممکن است این دو ویروس به رغم تفاوت‌صهای بیولوژیکی و مولکولی موجود بین آنها، برهمکنشی با همدیگر داشته باشند

Mixed infection in plants with more than one virus causes different types of host-virus interactions. Interactions between Cucumber mosaic virus (CMV) and Grapevine fanleaf virus (GFLV) were studied on seven species of experimental plants (Nicotiana benthamiana, N. clevelandii, Chenopodium quinoa, C. amaranticolor, Gomphrena globosa, Petunia hybrida and Cucurbita pepo) for the first time in the world. In Iran, these viruses have been detected in single infections on various plants in different areas. In order to study the interaction between CMV and GFLV, after biological purification of the viruses, for the ease of identification they were subjected to ELISA. To study relative competitiveness and severity of symptoms in the mixed infections, a completely randomized design with three replications and five treatments was applied under greenhouse conditions. These treatments included mechanical inoculation of plants with: (1) CMV then GFLV (C1G2), (2) GFLV then CMV (G1C2), (3) two viruses simultaneously (4) only CMV and (5) only GFLV. On 2 to 21 days after inoculation, symptoms developed on the experimental plants were recorded and analyzed by ELISA. Light absorption values recorded by microplate reader at 405 nm was considered as an indicator of the relative concentration of virus and analyzed by factorial analysis and compared with Duncan's test. Total RNA was also extracted from infected plants and analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) with specific primers which gave the expected band of 870 bp with CMV and 1512 bp with GFLV. In all samples treated with only GFLV a specific band (1512 bp) was observed. Treatment with both viruses at the same time in all samples with exception of N. clevelandii which not produced 870 bp band gave the desired bands (870 bp of CMV and 1512 bp of GFLV). In all samples treated with only CMV a specific band (870 bp) was observed. The target bands with C1G2 and G1C2 treatments were not observed, instead unwanted bands were amplified which was possibly due to incompatibility of the two primer pairs in the multiplex PCR. Results based on the light absorption values showed that the concentration of CMV in the mixed infection was increased in comparison with the plants that were infected with only CMV. These results indicated a unilateral synergism in favor of increased proliferation of CMV which implies that the two viruses may interact with each other despite their biological and molecular differences

‮‭SB‬

جوان مسجدلو، وحید

سخندان بشیر، نعمت، استاد راهنما

نعمت‌صاللهی، سویل، استاد مشاور

Gray Scale

نمایه‌سازی قبلی