۱۴۱۵۲پ
per
اثرات اریتروپیتین بر تغییرات هیستومورفومتری و استریولوژیک ژژنوم متعاقب ایسکمی-ری پرفیوژن روده کوچک در گربه
SF
/مهسا دارایی
: دامپزشکی
، ۱۳۹۳
، راشدی
چاپی
کارشناسی ارشد
حرفه‌صای دامپزشکی
۱۳۹۳/۱۱/۲۰
تبریز
روده یکی از اندام‌صهای بسیار حساس به آسیب‌صهای ناشی از ایسکمی‌ص-ری‌صپرفیوژن (I/R) است I/R .یک مشکل جدی در بسیاری از شرایط بالینی از قبیل ایسکمی حاد مزانتریک، انسداد روده، پیچ خوردگی روده کوچک و غیره می‌صباشد .بازگشت جریان خون به بافت‌صهای ایسکمیک می‌صتواند باعث آسیب بیشتری نسبت به ایسکمی اولیه شود که به عنوان آسیب ری‌صپرفیوژن شناخته می‌صشود .اریتروپویتین یک هورمون گلیکوپروتئینی است که به طور اولیه از کلیه ترشح می‌صشود و نقش هماتوپویتیک دارد .مطالعات متعدد نشان می‌صدهد که اریتروپویتین دارای اثرات محافظتی غیرهماتوپویتیک در آسیب‌صهای ناشی از I/R در بسیاری از بافت‌صها از قبیل قلب، کلیه، کبد، ریه و قلب می‌صباشد .بررسی‌صها نشان می‌صدهد که گزارشی از اثر پیش درمانی اریتروپویتین بر آسیب‌صهای I/R در گربه وجود ندارد .بنابراین مطالعه حاضر با هدف بررسی اثرات اریتروپیتین بر تغییرات هیستومورفومتری و استریولوژیک ژژنوم متعاقب I/R روده کوچک گربه انجام شد .در مطالعه حاضر تعداد ۲۰ گربه نر سالم از نظر بالینی به طور تصادفی به چهار گروه شم، گروه I/R بدون درمان و گروه‌صهای درمان با اریتروپویتین با دوز IU/kg ۱۰۰۰ و IU/kg ۳۰۰۰ تقسیم شدند .ایسکمی روده کوچک با بستن شریان مزانتر قدامی به مدت ۶۰ دقیقه القاء شده و سپس حیوانات به مدت ۱۸۰ دقیقه تحت ری‌صپرفیوژن قرار گرفتند .اریتروپویتین با دوزهای ۱۰۰۰ و IU/kg ۳۰۰۰ در هنگام شروع ری پرفیوژن به صورت تک دوز داخل وریدی تزریق گردید .نمونه‌صهای بافتی از ژژنوم به وسیله پانچ بیوپسی در زمان‌صهای قبل ایسکمی، انتهای ایسکمی و۶۰ ، ۱۲۰ و ۱۸۰ دقیقه بعد از ری پرفیوژن برداشته شده و در فرمالین بافر ۱۰ درصد فیکس شدند .متعاقب آخرین نمونه‌صگیری گربه‌صها با دوز بالای تیوپنتال سدیم آسان کشی شدند .نمونه‌صها به روش استاندارد و روتین تهیه مقاطع بافتی آماده شده و برش‌صهای سریالی پس از رنگ‌صآمیزیE& H،PAS ، تری کرم ماسون و تولوئیدن بلو با تکنیک‌صهای استریولوژی مورد ارزیابی هیستومورفومتریک قرار گرفتند .در نهایت داده‌صها با استفاده از نسخه ۱۹ نرم افزار SPSS مورد آنالیز آماری قرار گرفتند .نتایج نشان داد که ایسکمی باعث تخریب مختصر بافت پوششی بالاخص در ناحیه رأسی پرزها، کاهش ارتفاع و افزایش ضخامت پرزها و کاهش سطح پرزها می‌صشود .نتایج مشخص کرد که ری‌صپرفیوژن متعاقب ایسکمی به صورت وابسته به زمان باعث تخریب بافت پوششی پرزها، کاهش ارتفاع و افزایش عرض پرزها، کاهش پراکنش سلول‌صهای جامی در پرزها و افزایش آن در غدد روده-ای، کاهش سطح پرزها، اقزایش ضخامت طبقه زیرمخاطی و سروزی و همچنین تغییرات محرز در پراکنش مست‌صسل‌صها و دگرانوله شدن آنها، پلاسما سل‌صها، نوتروفیل‌صها و ماکروفاژها می‌صشود .مطالعات هیستولوژیک و استریولوژیک نشان داد که ری‌صپرفیوژن باعث تغییرات در ساختار بافت لنفوئیدی ضمیمه لوله گوارش) گالت (می‌صگردد .نتایج نشان داد که در هیچ یک از گروه‌صها طبقه عضلانی دچار تغییر مشخص و معنی داری نمی‌صشود .مطالعات میکروسکوپیک مشخص نمود که اریتروپویتین می‌صتواند به صورت وابسته به دوز و همچنین به صورت وابسته به زمان بسیاری از تغییرات ساختاری و هیستومورفومتریک ناشی از I/R که به نحوی در عملکرد بافت ژژنوم تأثیر گذار است را مهار نماید .با توجه به نتایج حاصله می‌صتوان گفت که استفاده از داروی اریتروپویتین قبل از برقراری ری‌صپرفیوژن می‌صتواند اثر محافظتی مناسبی در ساختار بافتی ژژنوم داشته باشد
The intestine is one of the most sensitive organs to intestinal ischemia and reperfusion (IR) injury. IR injury is an important disorder in many clinical conditions such as, acute mesenteric ischemia, intestinal obstruction, small intestinal volvulus and etc. Restoration of blood flow to ischemic tissues can result in even further damage known as reperfusion injury. Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein hormone, secreted primarily by the kidneys that has hematopoiesis role. Several studies have shown that EPO also has non-hematopoietic tissue protective effects on IR injury in many tissues such as cardiac, kidney, liver, lung and brain. To our knowledge, there are no reports about the effects of EPO pretreatment on the intestinal IR injury in cats. Therefore, this study was conducted to investigate the effect of EPO on histomorphometrical and stereological changes of jejunum following by intestinal ischemia-reperfusion injury in cat. In this study 20 healthy adult male domestic short-haired cats were divided in to 4 groups including: i) Sham-operated control group; ii) I/R control group without treatment; iii) EPO-treated group with 1000 IU/kg (EPO 1000); and iv) EPO-treated group with 3000 IU/kg (EPO 3000). Ischemia was induced with occlusion of the cranial mesenteric artery (CMA) for 60 min, followed by 180 min of reperfusion period. A single dose of rHuEPO at doses of 1000 and 3000 IU/kg was administered intravenously. Tissue samples of jejunum were collected before CMA occlusion, end of the ischemic episode, and at 60, 120, and 180 minutes after reperfusion by a biopsy puncher and were fixed in 10 buffered formalin. Following the last biopsy, cats euthanatized by IV administration of an overdose of thiopenthal sodium. Tissues were processed by routine and standard method and serial sections were stained by H&E, PAS, Trichrome masson and toluidine blue and evaluated by histomorphometrical and stereological methods. SPSS software version 19 was used for statistical analysis. Our results showed that ischemia caused mild damage in epithelial cells of villi, especially in the villis tip, a decrease of villis length and surface area and an increase of villis thickness. The results indicated that reperfusion after ischemia caused more villi injury, a significant decrease of villi length, gublet cell distribution in villi, surface area of villi, an increase of villi thickness, gublet cell distribution in crypt, tela submucosa and tunica serosa thickness and also a dramatic alterations in distribution of plasma cells, neutrophils, macrophages and deganulated mast cells in a time-dependent manner. Histological and stereological studies revealed that IR altered gut associated lymphoid tissue (GALT) architecture. Results showed that tunica muscularis had not any significant changes among groups. Microscopical studies indicated that EPO can inhibit structural and histomorphometrical changes of IR injury in a dose and time-dependent manner, and therefore can affect function of jejunum. Based on our results, it can be concluded that administration of erythropoietin before reperfusion has protective effects on histological structure of jejunum
SF
دارایی، مهسا
حمیدیان، غلامرضا، استاد راهنما
حنیفه، محسن، استاد راهنما
جارالمسجد، سید حسین، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
