عنوان

خالص سازی آنزیم اکتینیدین از میوه کیوی با استفاده از سیستم محلول دوفازی آبی پلی اتیلن گلایکول - سدیم سیترات

IR

۳۶۹۷پ

فارسی

IR

خالص سازی آنزیم اکتینیدین از میوه کیوی با استفاده از سیستم محلول دوفازی آبی پلی اتیلن گلایکول - سدیم سیترات

[پایان‌نامه]

Purification of Actinidin from Kiwifruit by using aqueous two-phase system PEG/sodium citrate

/ساجد نظیف کردار

: مهندسی شیمی

، ۱۳۹۷

۹۱ص.

:

زبان: فارسی

زبان چکیده: فارسی

چاپی - الکترونیکی

جدول، نمودار

کارشناسی ارشد

مهندسی شیمی - بیوتکنولوژی

۱۳۹۷/۱۱/۰۱

صنعتی سهند

هدف از انجام این پروژه خالص سازی آنزیم اکتنیدین از میوه کیوی با روشی کم هزینه برای مصارف پزشکی و صنعتی می باشد .در این پژوهش توزیع پذیری آنزیم اکتینیدین در سیستم های دوفازی آبی متشکل از پلیمر پلی اتیلن گلایکول با وزن های مولکولی ۶۰۰، ۴۰۰۰ و ۶۰۰۰ به همراه نمک سدیم سیترات با استفاده از طراحی آزمایش ۲۳ فاکتوریل صورت گرفت .عوامل موثر بر این توزیع پذیری شامل غلظت پلیمر، غلظت نمک ، pH و پارامتر های مورد بحث به ترتیب ضریب توزیع پروتئین، ضریب توزیع آنزیم، فعالیت ویژه و خلوص بودند .جهت سنجش غلظت پروتئین در دوفاز از روش برادفورد و برای سنجش فعالیت آنزیمی از هضم پروتئین کازئین استفاده گردید، همچنین جهت اثبات حفظ فعالیت آنریم در فاز پلیمری از سنجش کیفی هضم پروتئین ژلاتین و برای نشان دادن خالص سازی صورت گرفته از آزمون الکتروفوز در ژل پلی اکریل آمیدPAGE) - (SDSاستفاده گردید .ضریب توزیع برای آنزیم اکتنیدین در تمامی سیستم های مورد مطالعه بزرگتر از یک بود که نشان دهنده تمایل این آنزیم به حضور در فاز پلیمری است .با توجه به این نکته که ضریب توزیع پروتئین نقش اساسی در بهبود خالص سازی را ایفا می کند لذا کم بودن این پارامتر در بعضی از شرایط عملیاتی نشان دهنده پخش شدن پروتئین های دیگر در فاز نمکی است .بیشترین پارامتر خلوص در فاز پلیمری به ترتیب در سیستم های دوفازی پلیمر با جرم مولکولی ۶۰۰ با خلوص ۱۵/۲۳۵ ، پلیمر با جرم مولکولی ۴۰۰۰ با خلوص ۸۱۵ /۱۶ و پلیمر با جرم مولکولی ۶۰۰۰ با خلوص ۵/۴۴ حاصل گردید .با توجه به سخت بودن استفاده از پلیمر با وزن مولکولی ۶۰۰، کمتر بودن دامنه عملیاتی آن و با توجه به پایین بودن میزان خلوص به دست امده از پلیمر با وزن مولکولی ۶۰۰۰ لذا استفاده از پلیمر با جرم مولکولی ۴۰۰۰ تحت شرایط عملیاتی پلیمر با غلظت (w/w) ۱۵ نمک سیترات با غلظت (w/w) ۱۴ و ۶ =pHمنتج به دستیابی به بیشترین خلوص( ۱۶/۸۱۵) می گردد

The main aim of this study is the purification of actinidin from kiwifruit with a costeffective method for its medical and industrial applications. In this work partition manner of actinidin, protease from kiwifruit, investigated in aqueous two-phase system (ATPS) consisting of PEG with 600, 4000 and 6000 molar mass / sodium citrate as salt. A 23 factorial design was used to evaluate the effect of the following independent variables: PEG concentration, salt concentration and pH on the protein partition coefficient, enzyme partition coefficient, specific activity, and purification factor as responses. For protein concentration we used Bradford method, for enzyme activity analyzing and its maintenance we used casein and gelatin digestion and for checking purity we used SDS-PAGE electrophoresis. Enzyme partition coefficient for all conditions was higher than one which means that target biomolecule prefer partitioning in the polymer phase. According to the fact that protein partition coefficient plays very vital indeed role on purification factor so that keeping it in low values means that other contaminant proteins partitioned in the salt phase. The maximum purification factor in the polymer reach phase for PEG 600 was 15.235, for PEG 4000 was 16.815 and for PEG 6000 was 5.44. Despite the fact that using PEG with 600 MW was hard to handle, had tiny two-phase area, and also using PEG with 6000 MW caused lower purification factor, using PEG 4000(15 (w/w)) and sodium citrate (14 (w/w)) at pH=6 resulted on maximum purification factor

ba

Purification of Actinidin from Kiwifruit by using aqueous two-phase system PEG/sodium citrate

کیوی

اکتینیدین

خالص سازی

سیستم محلول دوفازی آبی( پلیمری-نمکی)

پروتئین

Kiwifruit, Actindin, Purification, Aqueous two-phase system (polymer/salt), Protein

کیوی، اکتینیدین، خالص سازی، سیستم محلول دوفازی آبی( پلیمری-نمکی)، پروتئین

نظیف کردار، ساجد

خوش فطرت، علی برادر، استاد راهنما

ایران

20230911

شیمی ،۲۰۸۸۶ ،۱۳۹۷

ل‌وکیلاگ‍ ن‌لیتا ی‌لپ‍ ی‌بآ ی‌زافود ل‌ولحم‍ م‌تسیس‍ زا ه‌دافتسا اب‍ ی‌ویک‍ ه‌ویم‍ زا ن‌یدینیتکا م‌یزنآ ی‌زاس‍ ص‌لاخ‍ - ت‌ارتیس‍ م‌یدس‍.pdf

عادی

عادی

3697.pdf

pch20886.pdf

0

ایمانی

متن

0

پ۳۶۹۷

فارسی

نمایه‌سازی قبلی

pe

TF

92029

1

a

Y