عنوان

Protein-Microarrays für die Wirkstoffentwicklung :

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9783658088033

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Protein-Microarrays für die Wirkstoffentwicklung :

[Book]

Herstellung und Charakterisierung eines bakteriellen Hitzeschockproteins.

Emilia Schax

Online-ausg

Wiesbaden

Springer Fachmedien Wiesbaden

2015

((100 Seiten))

BestMasters; EBL-Schweitzer

Geleitwort; Vorwort; Inhaltsverzeichnis; Abbildungsverzeichnis; Tabellenverzeichnis; Abkürzungsverzeichnis; 1 Einleitung; 1.1 Zielsetzung; 2 Theorie; 2.1 Hitzeschockproteine; 2.1.1 Evolution der Hitzeschockproteine; 2.1.2 Genregulation und Genexpression der Hitzeschockproteine; 2.1.3 Aufbau der Hitzeschockproteine; 2.1.4 Funktion der Hitzeschockproteine; 2.2 Helicobacter pylori und sein Hitzeschockprotein HtpG; 2.3 Hitzeschockproteine als Target zur Krankheitsbekämpfung; 3 Praktischer Teil; 3.1 Produktion des Hitzeschockproteins HtpG aus H. pylori; 3.1.1 Bioinformatische Vorarbeiten.3.1.2 Interaktion von HtpG mit anderen Proteinen3.1.3 Klonierungsarbeiten mit HtpG; 3.1.4 Expression und Aufreinigung von HtpG; 3.1.5 Zusammenfassung und Diskussion; 3.2 Direkt-kompetitiver Verdrängungsassay im Protein-Microarray Format; 3.2.1 Entwicklung des direkt-kompetitiven Verdrängungsassays; 3.2.2 Screening von Inhibitoren; 3.2.3 Zusammenfassung und Diskussion; 4 Zusammenfassung und Ausblick; 5 Materialien und Methoden; 5.1 Verbrauchsmaterialien; 5.2 Geräte; 5.3 Reagenzien; 5.4 Reaktionskits; 5.5 DNA, Enzyme, Marker, Antikörper; 5.6 Softwaretools; 5.7 Lösungen und Puffer.5.8 Inhibitoren5.9 Polymerase-Kettenreaktion; 5.10 Agarosegelelektrophorese; 5.11 Zusammensetzungen der Nährmedien; 5.12 Ligation; 5.13 Transformation; 5.14 Restriktionsenzymverdau; 5.15 Kultivierung; 5.16 Zellaufschluss und Proteinaufreinigung; 5.17 Dialyse und Entfernung des SUMO Fusionsproteins; 5.18 Polyacrylamid-Gelelektrophorese; 5.19 Kolloidale Coomassie-Färbung; 5.20 Semi-dry Western Blot; 5.21 Direkt-kompetitiver Verdrängungsassay; Literaturverzeichnis; Anhang; Ergänzende Ergebnisse.Emilia Schax beschreibt die Herstellung von Hitzeschockproteinen und die Entwicklung eines direkt-kompetitiven Inhibitor-Screenings für Hitzeschockproteine im Microarray-Format. Dieser Assay liefert in kürzester Zeit mit geringem Materialverbrauch Informationen zu den Bindeeigenschaften potenzieller Inhibitoren, die dann als mögliche Therapeutika dienen könnten. Der Assay basiert auf der Kompetition von fluoreszenzmarkierten ATP mit den potentiellen Inhibitoren um die ATP-Bindetasche der Proteine. Während der Masterarbeit wurden zehn potentielle Inhibitoren, die Geldanamycin- oder Reblastatin-

DNA microarrays.

Medicine.

Oncology.

Emilia Schax

Emilia Schax

[Book]

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