عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۸۵۶۷پ
فارسی
تهیه و انتخاب آنتی بادی منوکلونال تک زنجیره ای علیه پروتئین مرگ سلولی برنامه ریزی شده 1 موشی (mouse PD1)
[پایان نامه]
لیلا فتحی خسروشاهی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۴۰۱
۲۶۰ص
کارشناسی ارشد
زیست فناوری پزشکی
۱۴۰۱/۰۵/۱۸
مقدمه: نقطه چک کننده ایمنی مرگ سلولی برنامه ریزی شده 1 (PD-1)0F به عنوان عاملی که فعالیت سلول های کشنده سلولی T1F را در محل ریز محیط زیست توموری2F کنترل می نماید، می تواند نقش بسزایی در درمان سرطان ایفا نماید. بیان رسپتور PD-1 (PD1-R) بروی سطح سلول های T و از طرف دیگر بیان لیگاند رسپتور PD-1 (PD1-L) بروی سطح سلول های توموری منجر به وقوع پدیده ای به نام خستگی سلول T3F شده که به طبع آن توقف فعالیت ضد توموری رخ می دهد. بنابراین مسدود شدن PD1-R توسط لیگاندهای اختصاصی دیگر به عنوان راه حلی برای ممانعت از توقف زود به هنگام فعالیت سلول T مطرح شده است. آنتی بادی های مونوکلونال به دلیل شناسایی اهداف خاص با اختصاصیت و حساسیت بالا از کاربرد های بالینی فراوانی برخوردار هستند. خانواده شترسانان علاوه بر آنتی بادی های معمول، دارای آنتی بادی های دیگری که تنها از زنجیره سنگین ساخته شده اند نیز می باشند. ناحیه متغیر این نوع از آنتی بادی ها (نانوبادی) دارای خصوصیات ذاتی منحصر به فردی می باشند که از میان آنها داشتن ابعادی که تقریباً معادل یک دهم اندازه ی آنتی بادی های معمول می باشد، توان نفوذ بهتر به ریز محیط زیست تومور را فراهم می سازد. یکی از تکنیک های متداول به منظور تولید آنتی بادی های مونوکلونال تکنیک هیبریدوما می باشد اما از جمله محدودیت های آن شامل عدم توانایی تولید قطعات متنوع گرفته شده از آنتی بادی و دارا بودن یک پروسه زمانبر و پر زحمت می باشد. تکنیک نمایش فاژی4F علاوه بر توان تولید قطعات متنوع آنتی بادی با برقراری یک ارتباط مستقیم بین صفات ظاهری5F و صفات ژنیتیکی6F دسترسی سریعتر به قطعات مناسب را از میان یک جمعیت متنوع از قطعات فراهم می سازد. در این روش انتخاب قطعه با میل ترکیبی بهینه برای یک هدف خاص توسط چندین چرخه از یک پروسه بیولوژیکی به نام پنینگ7F (این واژه از پروسه پیدا کردن طلا بوسیله الک گرفته شده است) صورت می پذیرد.روش کار: بیان و تخلیص پروتئین نو ترکیب PD-1 به روش اینکلوژن بادی8F با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی (Ni-NTA)9F به منظور جداسازی پروتئین PD-1 برچسب شده با هیستیدین (His-Tag). تبدیل کتابخانه ژنی (از پیش تهیه شده بویسله ایمن کردن شتر نر 6-8 ماهه توسط آنتی ژن PD-1 به همراه چندین آنتی ژن دیگر) به کتابخانه فاژی. بکارگیری کتابخانه فاژی و پروتئین تخلیص شده در پروسه پنینگ به منظور رسیدن به کلنی نانوبادی های مورد نظر احتمالی. بیان نانوبادی های حاصل از پنینگ در فضای پری پلاسمیک میزبان باکتریایی و تهیه عصاره فضای پری پلاسمیک آنها. بررسی توان برهمکنش این نانوبادی ها با آنتی ژن PD-1 از طریق روش الایزای عصاره پری پلاسمیک (PE-ELISA)10F برای رسیدن به نانوبادی های منتخب به منظور تعیین توالی به روش سنگر.نتیجه و بحث: علیرغم صحبت ها و قل های داده شده در مورد در اختیار قرار دادن پروتکل از پیش تعریف شده خود مجموعه، وجود تمام امکانات و مواد لازم به منظور انجام کار و صحت کتابخانه ی از پیش تهیه شده، هیچکدام از این موارد در مورد این طرح مصوب توسط دولت وجود نداشت و این کار هیچ حاصل و نتیجه قابل ذکری ندارد جز اینکه با وجود مخالفت ها برای انجام کار صحیح از طرف مجموعه و البته حمایت های جناب آقای دکتر محمد علی مظلومی موفق به کسب تجربه در زمینه تکنیک نمایش فاژی و تخلیص پروتئین شدم.
نقطه چک کننده ایمنی
ایمونوتراپی
آنتی بادی های تک زنجیره ای
نانوبادی
آنتی بادی تک دومینی
باکتریوفاژهای رشته ای
تکنیک نمایش فاژی
پروسه پنینگ
تخلیص پروتئین به روش اینکلوژن بادی
تخلیص پروتئین به روش فضای پری پلاسمیک
، پدیدآور
فتحی خسروشاهی، لیلا
، استاد راهنما
، استاد راهنما
، استاد مشاور
، استاد مشاور
مظلومی، محمدعلی
بهدانی، مهدی
طالب خان گروسی، یگانه
رحیمی جمنانی، فاطمه
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20221129
۲۳۵۹ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
