عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۸۶۱۱پ
فارسی
بررسی سمیت نانو ذرات طلای حاصل از عصاره الکلی برگ و بذر کاسنی به روش سنتز سبز، بر روی سلول‌های HepG2
[پایان نامه]
معصومه فرهادیان نژاد
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۴۰۱
۱۵۵ص
کارشناسی ارشد
بیوشیمی بالینی
۱۴۰۱/۰۸/۲۴
مقدمه و هدف: سازمان جهانی بهداشت تخمین زده، جمعیتی که از داروهای گیاهی استفاده می‌کنند بیش از 80 درصد می‌باشند. با این وجود، اطلاعات علمی کمی در مورد اثر بخشی و بی‌خطر بودن گیاهان وجود دارد که با افزایش استفاده از داروهای گیاهی، تحقیقات علمی درباره آن‌ها ضروری است. خواص درمانی گیاهان دارویی ممکن است به دلیل وجود یک یا چند ترکیب زیست فعال مختلف در آن‌ها باشد از جمله آلکالوئیدها، ترپنوئیدها، تانن‌ها، سیانوژن‌ها، فلاونوئیدها و ...، که برخی از این ترکیبات ممکن است سمی بوده و گیاهان حاوی آن‌ها سطوح مختلفی از سمیت را در فرد ایجاد کنند. یکی از عوارض نامطلوب گیاهان آسیب کبدی است. کاسنی، گیاهی دارویی بوده و خواص درمانی بسیار زیادی از آن مشاهده شده اما اطلاعات سم شناسی در مورد آن محدود است. از طرفی، عصاره‌های گیاهی، می‌توانند به عنوان روش زیست سازگار جایگزین برای روش‌های شیمیایی و فیزیکی جهت سنتز نانوذرات، تحت عنوان "سنتز سبز" استفاده گردند که یک روش ساده، ارزان، و بی خطر است؛ بطوریکه نانوذرات تولید شده با این روش، با انواع مختلفی از سلول‌ها سازگاری زیستی دارد. نانوذرات طلا، به دلیل ویژگی‌های منحصر بفرد خود از جمله سازگاری زیستی و سمیت پایین، توجه زیادی را در علوم مختلف از جمله پزشکی به خود جلب کرده اند. با این وجود، استفاده گسترده از آن‌ها، نیاز به توسعه دانش مربوط به سمیت و زیست سازگاری آن‌ها دارد. بنابراین، در این مطالعه سمیت سلولی و ژنی عصاره‌های الکلی برگ و بذر کاسنی و نانوذرات طلای سنتز شده با آن‌ها برروی سلول‌های کبدی HepG2 مورد بررسی قرار گرفت.روش کار: برگ و بذر کاسنی با قرار گیری به مدت دو روز در اتانل 96% (ml83/g5) عصاره گیری شدند. در مورد عصاره برگ کلروفیل و در مورد عصاره بذر چربی آن جدا گردید و در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار گرفتند تا عصاره نهایی حاصل شود. سپس، سنتز نانوذرات طلا با غلظت 1 میلی‌مولار HAuCl4.3H2O و با غلظت 2.3 و 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر به ترتیب برای عصاره برگ و بذر صورت گرفت. جهت تایید سنتز نانوذرات طلا از اسپکتروسکوپی UV-Vis استفاده شد. نانوذرات پس از رسوب و جداسازی با اولتراسانتریفیوژ، با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز، TEM، DLS و پتانسیل زتا تعیین هویت شدند. جهت تعیین میزان پلی‌فنل‌ها و خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره‌ها، سوپرناتانت محلول واکنش سنتز نانوذرات طلا و نانوذرات طلا به ترتیب از تست‌های رنگ سنجی Folin-Ciocalteu و FRAP استفاده شد. سلول‌های HepG2، با غلظت‌های مختلف عصاره‌ها و نانوذرات تیمار شدند. سمیت سلولی عصاره‌ها و نانوذرات با تست‌های MTT، آزمون برداشت نوترال رد و LDH و سمیت ژنی با آزمون کامت قلیایی سنجیده شد. از تست کشندگی میگو آب شور نیز جهت بررسی سمیت سلولی استفاده شد.نتایج: تغییر رنگ محلول واکنش سنتز نانوذرات طلا و وجود پیک جذبی در 540 نانومتر در نتایج اسپکتروسکوپی UV-Vis، تائیدی بر سنتز نانوذرات بود. عدم افزایش پیک جذبی و توقف سنتز نانوذرات با عصاره‌های برگ و بذر پس از گذشت به ترتیب 7 ساعت و نیم و 3 ساعت، اتفاق افتاد. میانگین اندازه نانوذرات سنتز شده با عصاره برگ و بذر ، براساس نتایج TEM به ترتیب، 1.26 ± 9.52 و 5.25 ± 12.67 نانومتر و براساس DLS 175 و 285.5 نانومتر بود و پتانسیل زتا در مورد نانوذرات سنتز شده با عصاره برگ 9.92- و در مورد نانوذرات سنتز شده با عصاره بذر 10.7- میلی‌ولت بود. نتایج الکتروفورز ژل آگارز نیز با نتایج تست‌های تعیین هویت همسو بود. مقدار پلی‌فنل و فعالیت آنتی اکسیدانی در سوپرناتانت محلول واکنش سنتز نانوذرات نسبت به خود عصاره کاهش پیدا کرده بود که نشانگر شرکت پلی فنل‌ها و ترکیبات آنتی اکسیدانی موجود در عصاره، در پروسه احیا و سنتز نانوذرات بود. به علاوه، در نانوذرات نیز این موارد نسبت به عصاره کاهش پیدا کرده بود. نتایج تست‌های سمیت سلولی، سمیت غلظت‌های مشخصی از عصاره‌ها را نشان داد و عصاره برگ نسبت به عصاره بذر سمی‌تر بود. در حالیکه نانوذرات، سمیت سلولی بسیار پایینی را نشان دادند. در آزمون کامت قلیایی، در غلظت IC50 عصاره‌ها (تعیین شده با تست MTT) سمیت ژنی مشاهده شد در حالیکه در بالاترین غلظت مورد استفاده از نانوذرات در این مطالعه، سمیت ژنی رخ نداد.نتیجه گیری: برخلاف اینکه بنظر می‌رسد گیاهان دارویی کاملا بی‌خطر هستند، در این مطالعه، عصاره‌های الکلی برگ و بذر کاسنی برروی سلول‌های HepG2 سمیت سلولی و ژنی ایجاد کردند. بنابراین، گیاهان دارویی قبل از استفاده باید بطور کامل از نظر سم شناسی مورد بررسی قرار بگیرند. از طرف دیگر، سنتز سبز نانوذرات با کاسنی یک روش ساده و سازگار با محیط زیست است. نانوذرات سنتز شده با عصاره‌های الکلی برگ و بذر کاسنی، سمیت سلولی و ژنی بسیار پایینی نشان دادند که می‌تواند چشم اندازی برای کاربرد گسترده این نانوذرات در پزشکی باشد.
کاسنیان
Compositae
a09
a09
نانوذرات طلا
سنتز سبز
سمیت سلولی
سمیت ژنی
سلول‌های HepG2
، پدیدآور
فرهادیان نژاد، معصومه
، استاد راهنما
، استاد مشاور
نوروزی، آذین
پاک نژاد، ملیحه
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20221127
۲۳۶۱ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
