عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۷۰۸۶پ
فارسی
بررسی اثر تیمار ترکیبی از آگونیست های PPAR و fxr بر مسیر لیپولیز و لیپوژنز در ررده سلول کبدی HepG۲
[پایان نامه]
علی جلیلیان
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۴۰۰
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
بیوشیمی بالینی
استئاتوز کبدی شکل اولیه بیماری کبد چرب غیرالکلی (NAFLD) است که ناشی از رسوب غیرطبیعی چربی در سلولهای کبدی است. اسید لینولئیک کونژوگه (CLA) گروهی از ایزومرهای موضعی و هندسی اسید لینولئیک است که بعنوان لیگاند برای گیرنده های خانواده PPAR شناخته شده و بدلیل اثرات مفید آن بر بیماری های مزمن مانند سرطان ، سندرم متابولیک و خصوصا چاقی ، توجه زیادی را به خود جلب کرده است. اوبتیکولیک اسید(OCA) مشتق نیمه سنتتیک از اسید صفراوی است که آگونیست قوی گیرنده هسته ای FXR در کبد می باشد و بدلیل تاثیر آن در بهبود جریان صفرا ، برای درمان بیماری های کبد از جمله کلانژیت صفراوی اولیه استفاده می شود. هدف ازاین مطالعه بررسی اثرهم افزائی (سینرژیستی) مخلوطی از CLAو OCA بر تجمع چربی ها و بیان ژن های مرتبط با متابولیسم آنها (لیپوژنز، دفع و اکسیداسیون چربی ها) در سلول کبدی است که برای این منظور از سلول HepG2 تحت درمان با اسید پالمیتیک (PA) به عنوان مدل in vitro برای استئاتوز کبدی استفاده شد. مواد و روشها: در ابتدا با استفاده از تست MTT، غلظتهای سمی و کشنده CLA و OCA برای سلول HepG2 مشخص گردید. سپس بمنظور القاء لیپوژنز در سلول هایHepG2، اسید پالمتیک (PA) با غلظت 5/0 میلی مولار به محیط کشتDMEM حاوی گلوکز افزوده شد. اثر تیمار سلول¬ها با غلظت های غیر سمی OCA، CLA و ترکیبی از این دو به نسبت 1/6 بر میزان تجمع لیپید در سلولHepG2 و نیز مکانیسم مولکولی القاء شده توسط هر یک از تیمارها مورد بررسی قرار گرفت. مدت انکوباسیون 24ساعت و نمونه ها شامل: شاهد (BSA) ، مدل BSA + PA)) و گروههای تحت درمان (BSA-PA + CLA/OCA)بودند. رسوب چربی داخل سلولی ، تری گلیسیرید TG)) ، کلسترول تام TC)) ، بیان ژن و بیان پروتئین به ترتیب با رنگ آمیزی Oil-Red O ، کیت های رنگ سنجی آنزیمی ، real time PCR و وسترن بلات اندازه گیری شد.نتایج: اثرات سمی CLA وOCA برای سلول HepG2بترتیب در غلظتهای 180 و 60 میکرومولار مشاهده شد. حداقل دوز موثر CLA وOCA بر کاهش توتال لیپید درون سلولی بترتیب در غلظتهای 120 و 20 میکرومولار مشاهده گردید. اثر سینرژیستی از مخلوطهای CLA وOCA در کاهش توتال کلسترول دیده نشد. اثر سینرژیستی مخلوطهای CLA وOCA درکاهش توتال لیپید داخل سلولی بخاطر اثر هم افزائی مخلوطها بر کاهش تری گلیسیرید بوده و این هم افزائی نیز بدلیل اثر سینرژیستی مخلوطها بر افزایش بیان ژنهای CPT1 (در مسیر بتااکسیداسیون اسید چرب) و MDR3 (کانال دفع صفراوی فسفولیپیدها) بوده است.بحث و نتیجه گیری: با توجه به عدم مشاهده تاثیر گذاری CLA درغلظت کلسترول داخل سلولی و ژنهای مرتبط با لیپوژنز و از طرف دیگر نقش موثر OCA در کاهش کلسترول و مهار ژنهای مرتبط با لیپوژنز، احتمالا این دو ترکیب می توانند مکمل اثرات یکدیگر باشند. با در نظر گرفتن نقش مکملی این دو ترکیب و اثر سینرژیستی مشاهده شده در کاهش تری گلیسیرید بنظر می رسد که استراتژی درمان ترکیبی CLA و OCA چشم انداز روشن تری جهت درمان کبد چرب غیر الکلی فراهم می سازد.
استئاتوز کبدی
لینولئیک اسید کونژوگه
اوبتی کولیک اسید
اکسیداسیون اسید چرب
لیپوژنز
ترشح صفرا
، پديدآور
جلیلیان، علی
، استاد راهنما
، استاد راهنما
، استاد مشاور
پاک نژاد، ملیحه
گل محمدی، تقی
مشکانی، رضا
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
20221220
۲۱۶۴ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران ،کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
