ساخت و مشخص یابی داربستی بر پایه شیشه سرامیک پوشش داده شده با پلیمر زیین حامی کامفرول همراه با سلولهای بنیادی مزانشیمی برای مهندسی بافت استخوان
[پایان نامه]
فائزه اسماعیلی رنجبر
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۹
۸۲ص.
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
مهندسی بافت
در این مطالعه داربست شیشه سرامیک پوشش داده شده با پلیمر زیین حاوی داروی کامفرول همراه با سلول¬های بنیادی مزانشیمی ساخت و مشخصه یابی شد و داربست از نظر توانایی استخوان زایی در محیط برون تنی و درون تنی در مدل آسیب استخوانی کالواریا بدون تحمل وزن مورد ارزیابی قرار گرفت روش کار: شیشه زیست فعال 58S به روش سل ژل سنتز و مشخصه یابی شد، داربست های شیشه سرامیک به روش ریخته گری فومی سنتز شده و و با پوشش پلیمری زیین حاوی داروی کامفرول پوشش داده شدند و این داربست¬ها از نظر استحکام ، مورفولوژی، آزاد سازی دارو و زیست سازگاری و زیست تخریب پذیری ارزیابی شدند. سپس داربست ها برای بررسی اثر استخوان زایی در برون تنی با تست های آلکالین فسفاتاز، آلیزارین رد و Real Time PCR مورد ارزیابی قرارگرفتند و در پایان اثر این داربست¬ها بر بازسازی بافت استخوان آسیب دیده کالواریای رت با تست¬های میکروسیتی، رادیوگرافی و رنگ آمیز H&E و MTو ایمنوهیستوشیمی وآنالیز هیستومورفومتریک مورد بررسی قرار گرفتند. یافته ها: پوشش پلیمری زیین 7 درصد سطح داربست و تخلخل ها را کاملا پوشانده و استحکام داربست های پوشش دار بیشتر از 3 برابر داربست بدون پوشش پلیمری بود. نتایج نشان داد داربست ها زیست سازگار بوده و سلول های MG-63 برروی سطح داربست های پوشش دار و بدون پوشش گسترده شدند. داربست های پوشش دار و بدون پوشش زیست فعال بودند و بلورهای هیدروکسی کربنات آپاتیت سطح هر دو نوع داربست پوشش دار و بدون پوشش را پوشاند. زیست تخریب پذیری داربست های پوشش دار و بدون پوشش به ترتیب 3/17 و 12 درصد بود که این افزایش معنی دار نبود . کامفرول به صورت کنترل شده ای آزاد شد و 8/42 درصد دارو در طی 3 روز آزاد شد . رنگ آمیزی آلیزارین رد رسوب کلسیم را در ماتریکس خارج سلولی در گروه CP و CPDr نشان داد . بیان آلکالین فسفاتاز در گروه CPDr به طور معنی داری در مقایسه با گروه Bio افزایش یافت (P value<0.001) .ژن های COL1 و OCN در در گروه های CP و CPDr و به خصوص در زمان 21 روز به طور معنی داری افزایش یافت (P value<0.0001) نتایج حاصل از آنالیز کیفی رنگ آمیزی H&E و MT و IHC و میکروسیتی نشان داد که استخوان¬زایی در 12 هفته بعد از جراحی و در گروهCell CPDr در بهترین شرایط است. آنالیز هیستومورفومتریک نشان داد که تعداد استئوبلاست¬ها و استئوسیت¬ها در هفته 12 بعد از جــــراحی در گروه Cell CPDr 2/13±8/96 بود که نتایج رنگ آمیزی H&E و MT و IHCومیکروسیتی را تایید می¬کرد نتیجه گیری: ترکیب ویژگی های فیزیکی داربست های شیشه سرامیکی پوشش دار همراه با اثرات استخوان زایی کامفرول و سلول های بنیادی مزانشیمی می تواند راهکار جدیدی برای بازسازی استخوان در محل آسیب فراهم کند و همینطور یک دستاورد موثر برای بازسازی آسیب های استخوانی باشد .