بررسی سطح بیان گلوکوزیل ترنسفراز، فعالیت متابولیک و تولید بیوفیلم استرپتوکوکوس موتانس متعاقب آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئیدن بلو و کمپلکس کلروفیل - فیکوسیانین
[پایان نامه]
شیما افراسیابی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۹
۸۰ص.
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
باکتری شناسی پزشکی
۱۹/۱۴
حذف جزئی (انتخابی) پوسیدگی دندان یک روش مناسب برای کمک به درمان پوسیدگی عمیق در دندان با پالپ بدون علامت است. آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی (aPDT) به عنوان یک درمان مکمل برای کاهش باکتری¬های درون حفره پیشنهاد شده است. از اهداف اين مطالعه بررسی تأثیر aPDT با استفاده از لیزر دیود به همراه تولوئيدن بلو (TBO) و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین (CHL-PC) به عنوان فتوسنسیتیزر بر فعالیت متابولیک و کاهش تعداد باکتری¬های زنده موجود در مدل بیوفیلم تشکیل شده بر روی قطعات مینای دندان بوده است. همچنین، در این مطالعه بیان ژن gtfB و تولید پروتئین GtfB در استرپتوکوکوس موتانس در پاسخ به آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین مورد بررسی قرار گرفت.روش کار: اثر دوز لتال و ساب لتال آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی با استفاده از تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین بر روی مدل بیوفیلم آزمایشگاهی تشکیل شده بر روی قطعات مینای دندان با استفاده از روش کریستال ویوله آزمایش شد. بررسی فعالیت متابولیکی استرپتوکوکوس موتانس با استفاده از XTT مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. سمیت سلولی کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین با روش MTT assay ارزیابی شد. علاوه بر این، مطالعه حاضر با هدف بررسی تأثیر دوز ساب لتال آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی با استفاده از تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین بر بیان ژن gtfB و تولید پروتئین GtfB به ترتیب با استفاده از روش Real time PCR (qRT-PCR) و SDS-PAGE انجام شد. یافته¬ها: در این مطالعه آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی در حداکثر غلظت (100میکروگرم بر میلی لیتر از تولوئيدن بلو) و (5000 میکروگرم بر میلی لیتر از کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین) و با انرژی دانسیته J/cm2 12/103 باعث کاهش بیوفیلم استرپتوکوکوس موتانس به ترتیب63 و 36.93 درصد شد. آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین کاهش قابل توجهی در فعالیت متابولیک باکتری بترتیب 77 و 56/83 درصد در دوز ساب لتال را نشان داد. کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین در غلظت¬های مختلف کاهش قابل توجهی در بقای سلول فیبروبلاست لثه انسان (HGFs) نشان نداد. علاوه بر این، آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین به طور قابل توجهی بیان ژن gtfB را به ترتیب 00/4 و 53/3 برابر کاهش دادند. همچنین، کاهش قابل توجهی در تولید پروتئین GtfB از استرپتوکوکوس موتانس متعاقب آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین به ترتیب 00/82 و 93/53 درصد دیده شد. نتیجه: اين مطالعه تاثير بالقوه آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی بر پایه تولوئيدن بلو و کمپلکس کلروفیلین-فیکوسیانین را بر فاکتور¬های ویرولانس استرپتوکوکوس موتانس از جمله تشکیل بیوفیلم، فعالیت متابولیک، بیان ژن gtfB و تولید پروتئین GtfB نشان داد.