عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۶۳۷۲پ
فارسی
بررسی ارتباط بین میزان متیلاسیون پروموتر۱۲۴-miR با میزان بیان ژن آن و پروتئین DNMT۳B در تومورهای کولورکتال انسانی و رده سلولی۱۱۶-HCT
[پایان نامه]
شیوا شاه محمدنژاد
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۹
۱۳۶ص.
جدول، نمودار
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
بیوشیمی بالینی
۱۹/۹۳
سرطان روده ی بزرگ یا کولورکتال در جوامع پيشرفته، بعنوان دومين عامل مرگ و مير ناشی از سرطان در بالغين محسوب مي شود. یکی از ویژگیهای مشترک مولکولی مرتبط سرطان، تغییر میزان متیلاسیون عمومی DNA ژنومیک در نواحی پروموتور ژن های تومورزا یا سرکوب¬کننده توموراست. در طی مطالعات متعددی مشخص شده است که miR-124 در برخی سرطان‌ها کاهش بیان دارد. به همین منظور بررسی میزان متیلاسیون جزایر CpG ناحیه پروموتور miR-124 و پروتئین هدف آن DNMT3B که در فرآیند زنده مانی ، مهاجرت و تهاجم تومور کولورکتال انسانی نقش دارد هدف اصلی انجام این طرح است. روش کار: در این مطالعه از روش MSP به منظور سنجش میزان متیلاسیون ناحیه پروموتور miR-124 در تومورهای سرطان کولورکتال انسانی و بافت طبیعی مجاور آن استفاده شد. از تکنیک Real-Time CR به منظور سنجش میزان بیان ژن miR-124 دربافت های توموری و بافت طبیعی مجاور تومور در بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال انسانی و ردۀ سلولی HCT-116 استفاده شد. سطح پروتئین DNMT3B در بافت های توموری سرطان کولورکتال انسانی و بافت طبیعی مجاور آن و نیز رده سلولی HCT-116 با روش وسترن بلات بررسی گردید. میزان زنده مانی، مهاجرت و تهاجم رده سلولی HCT-116 به ترتیب با استفاده از روش های MTT، تست اسکرچ و تست تهاجم بررسی شدند. همچنین از داروی 5-AZA-CdR به منظور بررسی تاثیر تغییرات متیلاسیون در بیان miR-124، بیان پروتئین DNMT3B، زنده مانی، مهاجرت و تهاجم سلولی در رده سلول های HCT-116 استفاده گردید.به منظور مطالعه نقش miR-124 در میزان بیان پروتئین DNMT3B، زنده مانی، مهاجرت و تهاجم سلولی توالی نوکلئوتیدی مقلد miR-124 و مهارکننده miR-124 به سلول های رده HCT-116 به وسیله PEI ترآلوده شدند. یافته ها: نتایج این مطالعه نشان داد که پروموتور miR-124 به طور معنی داری در بافت های توموری سرطان کولورکتال انسانی در مقایسه با بافت های طبیعی مجاور فزونی متیل دارد بررسی میزان بیان miR-124 در این بافت ها نشان دهنده این موضوع بود که افزایش میزان متیلاسیون پروموتور miR-124 به طور معنی داری با کاهش بیان این میکرو RNA در نمونه های بافتی تومور سرطان کولورکتال انسانی مرتبط است. همچنین نتایج حاصل از وسترن بلات نشان دهنده افزایش بیان پروتئین DNMT3B در بافت های توموری سرطان کولورکتال انسانی در مقایسه با بافت طبیعی مجاور بود که این تغییرات با میزان بیان miR-124 ارتباط معکوسی را نشان می داد.متیل زدایی سلول های رده HCT-116 از طریق تیمار با دارویAZA-CdR-5 منجر به افزایش بیان این میکروRNA و کاهش بیان DNMT3B، زنده مانی، مهاجرت و تهاجم سلولی گردید. بحث: نتایج این مطالعه نشان دادند که کاهش بیان miR-124 از طریق متیلاسیون ناحیه پروموتوری ارتباط مستقیمی با افزایش بیان پروتئین DNMT3B دارد. همچنین استفاده از داروی 5-AZA-CdR در غلظت های 1 و μM5 منجر به افزایش بیان miR-124، کاهش بیان پروتئین DNMT3B، زنده مانی، مهاجرت و تهاجم سلولی در رده سلولی HCT-116 می گردد. miR-124 به عنوان ژن سرکوبگر توموری در سرطان کولورکتال از طریق متیلاسیون DNA کاهش بیان دارد؛ بنابراین میکرو RNA ممکن است به عنوان هدف بالقوه تشخیصی و درمانی درسرطان کولورکتال عمل کند.
miR-124
متیلاسیون
سرطان کولورکتال
DNMT3B
، پديدآور
شاه محمد نژاد، شیوا
، استاد راهنما
، استاد راهنما
، استاد مشاور
خلیلی، احسان
مشکانی، رضا
خاقانی، شهلا
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20221206
۲۱۰۶ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
