عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۶۰۲۶پ
فارسی
فارسی
بررسی اثرات تحریکی و مهاری micro RNA 30 در فرآیند خود نوزایی و تمایز سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد
[پایان نامه]
مریم خانه زاد
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۹
۸۹ص
جدول،نمودار
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
علوم تشریح
۲۰
اسپرمزایی فرآیندی پیچیده و بسیار سازمانیافته است که به تعادل بین تکثیر و تمایز سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) نیازمند است. تنظیم تعادل بین خودنوزایی و تمایز SSCs نیازمند برنامه دقیقی از بیان ژنهاست. مطالعات متعددی گزارش کردهاند که miRNAs به عنوان یک عامل حیاتی میتوانند بیان ژنها و تعیین سرنوشت SSCs در فرآیند اسپرمزایی را تنظیم کنند. با این وجود، عملکرد و مکانیزم مولکولی miRNAsمختلف در تعیین سرنوشت SSCs به صورت ناشناخته باقي مانده است. جهت فراهم کردن ابزاری مناسب و کاربردی در تشخیص مولکولی و درمان انواع بیماریها و ناباروری، نقش اثرات تحريكي و مهاري microRNA-30 بر تنظیم خودنوزایی و تمایز سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد مورد بررسی قرار گرفت.روش کار: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی موشهای نوزاد (6-3 روزه) بعد از جداسازی با روش Differential plating خالص شدند. درصد خلوص سلولها توسط فلوسایتومتری با دو نشانگر PLZF و GFRa1سنجیده شد. به دنبال کشت و رسیدن سلولها به تراکم confeluency)) مناسب، ترانسفکت miRNA-30 (100نانومولار) انجام شد. بیان ژنهای (ID4, PLZF) و ژن c-Kit 48 ساعت بعد از ترانسفکشن توسط تکنیک real time PCR مورد ارزیابی قرار گرفتند. بیان پروتئین PTEN به عنوان هدف بالقوه برای miRNA-30 و همچنین پروتئین FoxO توسط وسترن بلات اندازهگیری شد. در نهایت بعد از گذشت یک هفته تعداد و قطر متوسط کلونیها مورد بررسی قرار گرفتند.یافتهها: نتایج حاصل از فلوسایتومتری به ترتیب خلوص 23/96 درصد و 32/98 درصد برای نشانگر GFRa1 و PLZF را نشان داد. ترانسفکت miRNA-30mimic به سلولها سبب افزایش معنادار بیان ژنهای تمایزنیافته (ID4, PLZF) و در مقابل کاهش قابل توجه بیان ژن c-Kit شد. در حالی که در سلولهای ترانسفکت شده با miRNA-30 inhibitor کاهش قابل ملاحظه ژنهای ID4, PLZF و افزایش ژن c-Kit مشاهده شد. در مورد پروتئینهای FoxO و PTEN نتایج وسترن بلات حاکی از کاهش و افزایش معنادار به ترتیب در گروه mimic و inhibitor بود. تعداد و قطر متوسط کلونیها نیز در گروه mimic نسبت به سایرگروهها افزایش قابل توجهی داشت.نتیجهگیری: بر اساس نتایج به دست آمده میتوان گفت که افزایش بیان miRNA-30 در سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی سبب تنظیم و پیشبرد فرآیند خودنوزایی و کاهش بیان آن سبب مهار خودنوزایی و افزایش تمایز SSCs میشود. به عبارت دیگر احتمالا miRNA-30 از طریق PTENبه عنوان یکی از اهداف بالقوه خود، تعادل بین خودنوزایی و تمایز SSCs را تنظیم میکند.
تمایز سلولی
Cell differention
a12
a12
سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی
microRNA-30
خودنوزایی
، پدیدآور
خانه زاد، مریم
، استاد راهنما
، استاد راهنما
، استاد مشاور
، استاد مشاور
هدایت پور، عظیم
ابوالحسنی، فرید
حسن زاده، غلامرضا
نور اشرف الدین، سید مهدی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20230104
۲۰۱۸ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
