اثر سولفورافان بر کیفیت اسپرم افراد normozoospermic در طی فرایند انجماد ذوب
[پایان نامه]
جمال ولی پور
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۸
سی دی
کارشناسی ارشد
علوم تشریح
ناباروری اختلالی است که حدود %15زوجین را درگیر میکند. از میان عوامل مؤثر بر ناباروری، فاکتورهایمربوط به جنس مذکر، %50از علل ناباروری را تشکیل میدهند. امروزه علاوه بر درمان ناباروری، جهتحفظ باروری نیز بطور وسیعی از روشهای کمک باروری ()Assisted Reproductive Technology: ARTاستفاده میشود و انجماد ( )Cryopreservationیکی از این موارد است. انجماد اسپرم منجر به توقف همهفرآیندهای متابولیکی و بیولوژی سلول میشود. در طی انجماد بواسطه القا آپوپتوز یا استرس اکسیداتیو،شاخصهای عملکردی اسپرم از جمله بقا و تحرک آسیب میبینند که در نهایت منجر به کاهش کیفیتاسپرم و کاهش باروری بدنبال انجماد میگردد.مطالعات فراوانی برای یافتن راههای درمانی مؤثر جهت محدود کردن آسیبهای ناشی از انجماد صورتگرفته است. از این رو استفاده از مواد زنده نگهدارنده ( )Prosurvivalکه بواسطه اثر بر فاکتورهای دخیل درمسیرهای سیگنالی بر عملکرد اسپرم تاثیر مثبت گذاشته و در نهایت موفقیت ARTرا افزایش داده و میتواند در بالا بردن درصد باروری موثر باشد، مورد توجه محققان قرار گرفته است.اخیرا از سولفورافان که ماده ای در سبزیجات مانند کلم بروکلی و کلم می باشد، برای بهبود عملکرد سلولها در برابر استرس های اکسیداتیو استفاده شده است.سولفورافان ازطریق مسیر Keap1/Nrf2/AREباعثافزایش بیان ژن های آنزیم های آنتی اکسیدانی می شود و در نتیجه میزان استرس اکسیداتیو کاهش پیدامی کندمواد و روشها: ابتدا سولفورافان را با دوزهای 10 ،5 ،2میکرومولار به 15نمونه نورموزواسپرم اضاف میکنیم و سپس به مدت 1ساعت در داخل انکوباتور می گذاریم و پس از تعیین دوز موثر، دوز موثر را به 25نمونه نورموزواسپرم اضاف می کنیم و به مدت 2هفته انجماد می دهیم. میزان تحرک اسپرم ها با استفاده از9دستگاه CASAو برای تعیین میزان آپوپتوز با استفاده از رنگ آمیزی YO-PRO-1 and PIو برای تعیین ROSداخل سلولی با استفاده از DCFH-DAو DHEبا استفاده از فلوسایتو متری و برای تعیینپراکسیداسیون لیپید های غشا با استفاده از کیت MDAو با الیزا انجام شد.نتایج:نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که اضافه کردن سولفورافان به محیط انجمادی میزان آپوپتوز را نسبتبه گروه کنترل به طور معناداری) (p<0.001کاهش داده است. همچنین در این مطالعه نشان داده شد کهسولفورافان می تواند میزان H2O2و MDAرا به طور معناداری) (p<0.01و میزان- O2را به طورمعناداری) (p<0.05نسبت به گروه کنترل کاهش دهد.نتیجه گیری: اضافه کردن سولفورافان به مدیوم انجماد اسپرم می تواند بر میزان پراکسیداسیون لیپید هایغشاء و سطح گونه های واکنشی اکسیژن و میزان آپوپتوز اثر محافظتی داشته باشد و همچنین می تواندباعث بهبود تحرّک، مورفولوژی و زنده مانی بعد از فرایند انجماد-ذوب شود