تولید و تعیین خصوصیت آنتی بادی منوکلونال علیه فاکتور رونویسی Nanog به عنوان یک مارکر سلول های بنیادی و سرطانی
[پایان نامه]
پریسا جوادی فتح
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۸
سی دی
کارشناسی ارشد
بیوتکنولوژی پزشکی
در طول سه دهه گذشته پیشرفت قابل توجهی در حوزه ی شناخت و درمان سرطان شکل گرفته است، اما متاسفانه سرطان هنوز هم به عنوان دومین علت مرگ و میر در جهان شناخته می شود. تشخیص بهنگام سرطان در مراحل اولیه، زمانی که قابلیت بیشتری جهت درمان وجود دارد از اهمیت خاصی برخوردار است. بهبود روش هایی برای غربالگری و تشخیص سرطان در افراد بدون نشانه به عنوان هدف اصلی بسیاری از تحقیقات قرار گرفته است. در سال های اخیر مطالعاتی جهت شناخت بیشتر در مورد بیومارکر ها به عنوان ابزار هایی برای تشخیص و پیش آگهی سرطان انجام شده است و انواع متفاوتی از بیومارکر ها شناخته شده اند.Nanog یک فاکتور نسخه برداری است که در خودنوسازی و پرتوان بودن سلول های بنیادی جنینی دخیل می باشد ، همچنین نقشی کلیدی در رشد و تکثیر، مهاجرت و تهاجم سلول های سرطانی دارد. بیان Nanog در بسیار ی از سرطان ها به اثبات رسیده است. ویژگی های خاص Nanog موجب شد تا این پروتئین به عنوان یک بیومارکر تشخیصی سرطان مطرح و مورد ارزیابی دانشمندان قرار گیرد.هدف این مطالعه تولید آنتی بادی های مونوکلونال جدید علیه Nanog به عنوان یک ابزار تشخیصی در سرطان های انسانی می باشد. برای فاکتور نسخه برداری Nanog پپتیدی طراحی شد و با اتصال به پروتئین KLH ،جهت ایمونیزاسیون موش های BALB/c ، مورد استفاده قرار گرفت. آنتی بادی مونوکلونال تولید شده از سوپرناتانت کلون نهایی، به وسیله ی ستون کروماتوگرافی افینیتی تخلیص شد و توانایی شناسایی پپتید توسط آنتی بادی ها به وسیله ی آزمون الایزا مورد بررسی قرار گرفت. واکنش پذیری بالای آنتی بادی با آنتی ژن مورد نظر نیز توسط تکنیک های وسترن بلات، فلوسایتومتری و ایمونوسیتوشیمی و ایمونوهیستوشیمی به اثبات رسید و نتایج حاصل از مطالعه نشان میدهد که آنتی بادی های تولید شده پتانسیل کاربردی بالایی را در تکنیک های فوق الذکر دارا می باشد.