بررسی Bystander effect اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومپتانس متعاقب فتودینامیک تراپی بر بیوفیلم میکروبی و بیان ژن fimA
[پایان نامه]
مرضیه مهدی زاده آری
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۸
۸۰ص.
جدول نمودار
سی دی
کارشناسی ارشد
میکروب شناسی پزشکی
۲۰
مقدمه: Bystander effect که در سلول های میکروبی مجاور (Bystander cell) دیگر سلول های میکروبی که مستقیماً تابش دریافت نمودند ایجاد می شود، تظاهراتی از خود نشان می دهند که هیچ گاه در غیاب سلول های میکروبی که مستقیماً تابش دریافت کرده اند رخ نمی دهد. هدف از این مطالعه بررسی Bystander effect اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس متعاقب فتودینامیک تراپی (aPDT) با کورکومین (Cur) بر فعالیت متابولیکی، بیان ژن و بیوفیلم میکروبی بوده است.روش اجرا: Bystander effect ناشی از سوسپانسیون سلولی، سوپرناتانت و پلت سلولی اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT بر بقای میکروبی، تولید بیوفیلم میکروبی، فعالیت متابولیکی، فعالیت افلاکس پمپ و توانایی کوروم سنسینگ اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس untreated به ترتیب به واسطه microbial viability assay،biofilm formation assay ، XTT reduction method، ethidium bromide (EtBr) accumulation assay و Escherichia coli-based bioassay بررسی شد. همچنین تغییرات بیان ژن fim A به دنبال دریافت Cur-aPDT نیز به واسطه تکنیک qRT-PCR بررسی شد.یافته ها: بقای میکروبی اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با سوسپانسیون سلولی و سوپرناتانت اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT به ترتیب 7/82 % (P=0.001) و 2/76 % (P=0.01) کاهش یافت. در حالی که بقای اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با پلت سلولی اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT 5/5 % (P=0.07) افزایش نشان داده است. فعالیت متابولیکی باکتری بعد مواجهه با سوسپانسیون سلولی، سوپرناتانت و پلت سلولی اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT به 6/42 % ( P=0.02)، 3/35 % (P=0.03) و 4/9 % (P=0.5) کاهش یافتند. اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با سوسپانسیون سلولی، سوپرناتانت و پلت سلولی اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT به نسبت با گروه کنترل که شامل اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس می باشد که تابش Cur-aPDT دریافت نکردند (untreated)، کاهشی در حدود 2/83 % (P=0.001 )، 2/77 % (P=0.01) و 9/21 % ( P=0.09) در مدیاتور های کوروم سنسینگ نشان دادند. تجمع EtBr در اگری گاتی باکتر اکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با سوسپانسیون سلولی، سوپرناتانت و پلت سلولی اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT به نسبت با گروه کنترل (untreated) تغییر چشمگیری نشان نداد (P<0.05). میزان تولید بیوفیلم میکروبی در اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با سوسپانسیون سلولی و سوپرناتانت اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT در مقایسه با گروه کنترل به ترتیب 73/2% و 25/2% کاهش یافته است .(P<0.05)درحالی که با 08/0% افزایش در میزان تولید بیوفیلم اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس بعد مواجهه با پلت اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT مشاهده شد (P=0.8). میزان بیان ژن بیوفیلم میکروبی در اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده سوسپانسیون سلولی و سوپرناتانت دریافت کننده Cur-aPDT به ترتیب 8/6 و 3/5 برابر نسبت به گروه کنترل کاهش نشان دادند که این مقدار برای اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس در مواجهه با پلت سلولی اگری گاتی باکتراکتینومایستم کومیتانس دریافت کننده Cur-aPDT، 9/0 برابر افزایش بوده است.نتیجه گیری: Cur-aPDT به واسطه Bystander effect قادر به کاهش رشد و بقای میکروبی، فعالیت متابولیک میکروبی، ظرفیت افلاکس پمپ، توانایی کوروم سنسینگ توسط باکتری می باشد. هم چنین Bystander effect ناشی از Cur-aPDT باعث کاهش تولید بیوفیلم و کاهش بیان ژن fim A می شود. به عنوان مهم ترین نتیجه می توان به این موضوع اشاره داشت که Bystander effect ناشی از Cur-aPDT در همراهی با اثرات مستقیم Cur-aPDT باعث تقویت آنتی میکروبیال فتودینامیک تراپی به عنوان یک روش درمانی مکمل جهت درمان عفونت های موضعی می شود.