تولید آنتی بادی پلی کلونال IgY عليه استرپتوکوكوس موتانس و بررسی اثر مهاري آن بر تشكيل بيوفيلم باکتری در شرایط برون تنی
[پایان نامه]
سمانه سادات راثی ورعی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۸
۸۳ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
بیوشیمی بالینی
پوسیدگی دندان یکی از رایجترین بیماریها در بین مردم جهان است. استرپتوکوک موتانس، کوکسی گرممثبت و بیهوازی اختیاری است. این باکتری مهمترین عامل پوسیدگی و کرمخوردگی دندان است. این ارگانیسم در حضور ساکارز، تحت pH پایین مسئول دمینرالیزه¬کردن دندان است. باکتری استرپتوکوکوس موتانس دارای آنتیژنهای متعددی است. گلوکوزیلترنسفراز از مهم¬ترين آنزيمهای دخيل در پوسيدگي دندان توسط باكتري استرپتوکوکوس موتانس محسوب میشود. برای درمان بیماری¬های مرتبط با این باکتری عمدتا از آنتی¬بیوتیک¬ها استفاده می¬شود که دارای عوارض زیادی می¬باشند. از جمله این عوارض می توان به از بین بردن باکتری¬های مفید علاوه بر باكتري¬هاي مضر توسط آنتی¬بیوتیکها اشاره کرد. با توجه به این موارد و با گسترش سویه¬های باکتری مقاوم به آنتی¬بیوتیک نیاز به استراتژی¬های جایگزین در کنترل بیماری¬های عفونی بیشتر از گذشته احساس می¬شود لذا امروزه استفاده از آنتی بادی¬ها رویکرد نسبتا جدیدی است که می¬توان با کمک آن گامی در جهت بهبود روش¬های موجود برداشت. مرغ حیوانی است که در سال¬های اخیر به عنوان منبع تولید آنتی¬بادی IgY مورد توجه قرار گرفته است.هدف مطالعه: هدف از این مطالعه تولید آنتی¬بادی پلی¬کلونال IgY علیه باکتری استرپتوکوکوس موتانس و بررسی اثر مهاری آن بر تشکیل بیوفیلم در این باکتری در شرایط in vitro می¬باشد.مواد و روش¬ها: در مطالعه پیش رو از باکتری استرپتوکوکوس موتانس و آنزیم گلوکوزیلترنسفراز برای ایمنی¬زایی تعدادی مرغ و تولید آنتی¬بادی استفاده گردید. پس از جمع¬آوری نمونه¬ها، آنتی¬بادی IgY با استفاده از روش رسوبدهی با NaCl استخراج شد. در این مطالعه میزان تیتر آنتیبادی در روزهای مختلف بعد از تزریق با روش الایزای غیر مستقیم مورد بررسی قرار گرفت. به منظور ارزیابی اثر مهاری دو نوع آنتیبادی بر تشکیل بیوفیلم توسط باکتری استرپتوکوکوس موتانس پس از تیمار باکتری با آنتیبادیهای به دست آمده، میزان کاهش رشد باکتری و کاهش میزان تولید بیوفیلم باکتری در حضور آنتیبادیها در مقایسه با کنترل BSA و زرده غیر ایمن مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: میزان رشد و تشکیل بیوفیلم توسط باکتری استرپتوکوکوس موتانس در مقایسه با کنترل BSA و زرده غیرایمن نشان داد که آنتیبادی علیه استرپتوکوکوسموتانس نسبت به آنتیبادی علیه آنزیم گلوکوزیلترنسفراز به طور چشمگیری میزان رشد باکتری را کاهش داد، در صورتیکه نقشآنتیبادی علیه آنزیم گلوکوزیلترنسفراز در کاهش تشکیل بیوفیلم توسط باکتری در مقایسه با آنتیبادی علیه استرپتوکوکوس موتانس بیشتر بود. . نتیجه¬گیری: آنتی¬بادی¬های بهدست آمده در این مطالعه توانستند رشد باکتری و تشکیل بیوفیلم توسط باکتری استرپتوکوکوس موتانس را در ایزوله اختصاصی کاهش دهند. همچنین هر یک از آنتیبادیها علاوه بر مهار رشد و تشکیل بیوفیلم توسط باکتری در ایزوله اختصاصی، توانایی مهار رشد و تشکیل بیوفیلم توسط سایر ایزولههای بیماران و سویه استاندارد را نیز دارد.