عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۳۹۲۳پ
فارسی
فارسی
بررسی نقش بیان FHIT و تداخل آن با P53 در آپو پتوز القا شده با اتو پو زاید در سلول های MCF-7
[پایان نامه]
اعظم خدری
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۱۳۹۷
۱۳۰ص.
جدول نمودار
سی دی
دکتری تخصصی(PHD)
بیوشیمی بالینی
پروتئین یک مهار کننده توموری است که در پاسخ به صدمه به عمل کرده و در برخی از سرطان¬ها حذف شده است. با توجه به نقش این پروتئین در صدمه به DNA، اما مکانیسم پیام رسانی و تداخل آن با پروتئین¬های آپوپتوزی شامل p53 و p38 در آپوپتوز ناشی از صدمه DNA تابحال بررسی نشده است. در این مطالعه، با استفاده از مدل صدمه به DNA ناشی از اتوپوزاید، نقش FHIT و ارتباط آن با p53 , p38 را بررسی کردیم.مواد و روشها: سلول هایMCF-7 وسلول¬های MCF-7 که دارای p53کاهش بیان یافته بودند به مدت 1،3 و 6 ساعت تحت تیمار با اتوپوراید با غلظت 10 و 100 میکرومولار قرار گرفتند. برای بررسی اثر کاهش بیان و یا افزایش بیان FHIT، سلول های 24 ساعت قبل از تیمار با اتوپوزاید برای با FHIT siRNA و یا با FHIT construct ترنسفکت شدند. جهت بررسی اثر مهار کننده p38، نیم ساعت قبل از تیمار با اتوپوزاید سلول¬ها در مجاورت مهار کننده p38(SB202198) با غلظت 10 میکرومولار قرار گرفتند. پس از تیمار، پروتئین¬ها لیز شدند و بیان پروتئین ¬های FHIT،p53 ، MDM2 و p-p38 با وسترن بلات ارزیابی شد. برای اندازه¬گیری بیان BAX و p21 ، RNA از سلولها تهیه شد و بیان توسط Real time PCR ارزیابی شد. در نهایت سیکل سلولی توسط PI و آپوپتوز توسط AnnexinV/PI با استفاده از فلوسیتومتری مورد سنجش قرار گرفت و فعالیت کاسپاز 9 با الایزا ارزیابی شد.نتایج: ما نشان دادیم که افزایش بیان FHIT، p53 و فعالیت p38 به دنبال تیمار با اتوپوزاید پس از یک ساعت شروع می¬شود. افزایش بیان FHIT منجر به افزایش بیان p53 و فعالیت p38 و افزایش آپوپتوز به دنبال آسیب DNA ناشی از اتوپوزاید در مقایسه با سلول¬های کنترل می¬شود. کاهش بیان FHIT، منجر به کاهش بیان p53 و به تاخیر افتادن فعالیت p38 و مهار کامل آپوپتوز ناشی از اتوپوزاید می¬شود. مهارفعالیت p38، بیان FHIT، p53 و القا آپوپتوز در این سلول¬ها را مهار می¬کند. بنابراین فعالیت p38 به دنبال تیمار با اتوپوزاید منجر به افزایش بیان FHIT و p38 می¬شود.در سلول-های MCF-7 که دارای p53 کاهش بیان یافته بودند، مهار فعالیت p38 باعث افزایش بیان FHIT و القا آپوپتوز می¬شود. بحث و نتیجه گیری: نتایج ما نشان می¬دهد¬ وقتی سلول¬هایMCF-7 در معرض اتوپوزاید قرار می-گیرند از طریق مکانیسمی که دربرگیرنده فعالیت و تعامل مسیرهای p38-FHIT-p53 می¬باشد، آپوپتوز افزایش می¬یابد. نتایج بدست آمده نشان مید¬هد که با مداخله دارویی/ژنتیک در این مسیرها می توان روش¬های درمانی نوینی را برای سرطان سینه ارائه داد.
FHIT
p53
p38
اتوپوزاید
آپوپتوز
، پدیدآور
خدری، اعظم
، استاد راهنما
، استاد راهنما
خاقانی، شهناز
قهرمانی، محمد حسین
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20230214
۱۸۰۶ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
