عنوان

بررسی تاثیر ترانسفکشن رده سلولی Hela با ژن TSGA10 بر بیان miR-183

۹۲۹۴۸پ

فارسی

فارسی

بررسی تاثیر ترانسفکشن رده سلولی Hela با ژن TSGA10 بر بیان miR-183

[پایان نامه]

فائزه ذوالفقاری

دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی

1396

125ص.

جدول نمودار

سی دی

کارشناسی ارشد

ژنتیک انسانی

سرطان يكي از شايع ترين علل مرگ در جهان است. هر یک از مراحل سرطان ممکن است شامل مکانیسم‌های مختلفی در سطح سلولی، ژنتیکی و اپی‌ژنتیکی باشد. بسیاری از این مکانیسم‌های سلولی و مولکولی مربوط به سرطان در زمينه آغاز، پيشرفت، مهار و پيشگيري سرطان ناشناخته مانده است. امروزه مشخص شده است كه يكي از عواملي كه در مكانيسم‌هاي مولكولي سرطان نقش مهمي دارد miRNAها مي‌باشد. نقش miRNAها در تنظيم بيان ژن‌هاي ديگر شناخته شده است. در رابطه با سرطان ژن‌هاي متعددي تا كنون نام برده شده‌اند. دسته‌اي از اين ژن‌ها، ژن‌های سرطان-بیضه نام دارند. این ژن‌ها عمدتا در سلول‌هاي ژرمينال مرد بيان مي‌شوند. آن‌ها هيچ بيان يا بيان بسيار جزئي در ساير بافت‌هاي سوماتيک دارند، اما ممكن است به صورت نابجا در سرطان‌هاي مختلف انسان بيان شوند. يكي از اين ژن‌ها، TSGA10 است. TSGA10 در اصل به عنوان يک پروتئين مخصوص بيضه مشخص شد ولي برخی مطالعات بيان TSGA10 را در تعدادي از سرطان‌ها نشان داده است. عملكرد TSGA10 به خوبي مشخص نشده است، اگرچه پيشنهاد شده است كه به عنوان يک انكوژن عمل مي‌كند ولي شواهدي هم وجود دارد كه نشان مي‌دهد به عنوان سركوبگر تومور هم عملكرد دارد. اخيرا گزارشاتي در رابطه با برهمكنش TSGA10 و برخي miRNAها ارائه شده است. با این وجود، تعامل احتمالی بین TSGA10 و microRNA‌ها کاملا روشن نشده است. با توجه به مطالعات insilico كه نشان مي‌دهد TSGA10 داراي سه جایگاه اثر بالقوه براي miR-183 است، در اين مطالعه، تغيير بيان miR-183 در رده سلولي Hela كه داراي افزايش بيان ژن TSGA10 مي‌باشد نسبت به رده سلولي Hela كه داراي بيان بسيار اندك ژن TSGA10 است را مقايسه می‌كنيم. نتايج اين بررسي نشان خواهد داد كه افزایش بیان TSGA10 چه تاثیری بر بیان miR-183 در رده سلولی Hela دارد و همچنین چه تاثیری ب مي‌تواند بر رشد رده سلولي Hela تأثیر داشته باشد.روش کار: در این مطالعه وکتور بیانی حاوی TSGA10 به رده سلولی Hela ترانسفکت شد، به طوری که این رده سلولی، TSGA10 را به صورت دائم بیان کند. با استفاده از روش Real Time-PCR، بیان TSGA10 در رده سلولی مورد مطالعه تأیید شد. با استفاده از آزمون MTT، اثر افزایش بیان TSGA10 بر رشد سلول‌های Hela بررسی شد. همچنین با بکاربردن Real Time RT-PCR تأثیر افزایش بیان TSGA10 بر بیان miR-183 مورد مطالعه قرار گرفت.یافته‌ها: یافته‌های حاصل از این مطالعه نشان داد که افزایش بیان TSGA10 می‌تواند رشد و تکثیر سلول‌های Hela را مهار کند. همچنین در این مطالعه مشاهده شد با افزایش بیان TSGA10 بیان miR-183 کاهش یافت.نتیجه‌گیری: در این مطالعه مشاهده شد که افزایش بیان ژن TSGA10 در رده سلولی Hela از مسیر غیر مستفیم بیان miR-183 را کاهش داد. miR-183 نه تنها موجب افزایش بیان HIF-1α می‌شود، بلکه خود HIF-1α نیز از طریق فیدبک مثبت بر روی پروموتر miR-183 باعث افزایش بیان آن می‌شود و در نتیجه پایداری HIF-1α را زیاد می‌کند. از سوی دیگر بر اساس مطالعات گذشته، بیان TSGA10 موجب عدم ورود HIF-1α به هسته می‌شود و در نتیجه از اثر مثبت آن بر روی miR-183 جلوگیری می‌کند. بدین ترتیب می‌توان گفت که یکی از مکانیسم‌هایی که باعث کاهش بیان miR-183 در هنگام افزایش بیان TSGA10 می‌شود، اثر مهاری TSGA10 بر روی فعالیت HIF-1α است. همچنین در این مطالعه اثر افزایش بیان ژن TSGA10 بر روی رشد و تکثیر رده سلولی Hela بررسی شد. نتایج نشان داد که افزایش بیان ژن TSGA10 می‌تواند تکثیر سلول‌های Hela را مهار کند.

miR-183

میکروRNA

TSGA10

، پدیدآور

ذوالفقاری، فائزه

، استاد راهنما

مدرسی، محمد حسین

دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی

ایران

20230429

1646ف

دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی

p

TF

92029

a

Y