شناسایی و تعیین مقدار داروهای آمی تریپتیلین و نورتریپتیلین با استفاده از روش میکرو استخراج مایع- مایع - تغییر قطبیت حلال استخراج کننده( LLME-SHS) با دستگاه HPLC در نمونه های پلاسما
[پایان نامه]
معصومه صباغی ده آبادی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
۹۸
سی دی
کارشناسی ارشد
سم شناسی پزشکی
طبق تعریف سازمان بهداشت جهانی افسردگی احساس غم پایدار و کاهش تمایل به انجام کارهایی که بصورت معمول از آن لذت می بریم، ونیزکاهش انگیزه انجام امور روزمره که حداقل به مدت دو هفته بطول انجامد. یکی از شایع ترین علت مرگ و میر ناشی از مسمومیت های دارویی و همچنین خودکشی مسمومیت با داروهای ضدافسردگی سه حلقه¬ای (TCA) می¬ باشد. بنابراین شناسایی و تعیین مقدار آن با روش های آنالیزی ساده و مؤثر با حساسیت بالادر مایعات بیولوژیک بدن برای انجام اقدامات درمانی از اهمیت زیادی برخوردار است.روش کار: حلال استخراجکننده (Switchabe Hydrophilicity Solvent(SHS)) در روش Switchabe Hydrophilicity Solvent (SHS) با استفاده از آب، تری اتیل آمین و یخ خشک ساخته شد و استخراج را انجام دادیم و توسط دستگاه HPLC با ستون C8 و دتکتور UV اندازه گیری گردید در این روش از فاز متحرک استونیتریل و بافر سدیم دی هیدروژن فسفات (60:40) و سیستم شویش ایزوکراتیک با سرعت 1 میلیلیتر بر دقیقه استفاده شد ودرنهایت فاکتورهای موثر بر فرآیند میکرواستخراج مانند نوع حلال، اثر pH ، اثر حجم SHS، اثر حجم NaOH، اثر حجم نمونه بر میزان بازیافت داروهای مورد نظر موردبررسی قرار گرفتند. پارامترهای معتبر سازی روش آنالیز مانند اختصاصی و انتخابی بودن، خطی بودن، صحت، دقت، فاکتور تغلیظ، بازیافت نسبی، بازیافت استخراج، تعیین حد تشخیص و تعیین حد تعیین مقدار روش موردبررسی قرار گرفتند.*یافتهها :*نتایج بهینهسازی فاکتورهای مؤثر در فرآیند استخراج بهصورت؛ حجم نمونه برابر با 10 میلیلیتر، حجم تری اتیل آمین پروتونه برابر با 1 میلیلیتر، حجم NaOH 10 مولار برابر با 2 میلیلیتر ، زمان ورتکس نمونه برابر با 3 دقیقه و زمان سانتریفیوژ نمونه برابر با 6 دقیقه در 4000 دور در دقیقه بود. پاسخ در بازه 25/1-0063/0 میکروگرم بر میلیلیتر خطی بود و R2 هر دو داروی مورد نظر بالاتر از 99/0% بودند. نتایج بررسی پارامتر دقت در تغییرات درون روزی و بین روزی آنالیز داروهای مورد نظر در این روش براساس RSD، کمتر از 5 درصد و صحت روش برابر با 96درصد به دست آمد. کمترین حد شناسایی(LOD) داروهای مورد نظر در این روش برابر با 18/0 و 20/0نانوگرم بر میلیلیتر و کمترین حد تعیین مقدار(LOQ) آن برابر با 58/0 و 62/0 نانوگرم بر میلیلیتر به ترتیب برای داروهای آمی تریپتیلین و نورترپتیلین بود. همچنین EF برابر با 6/159و بازیافت نسبی (RR) برابر با 96% به دست آمد.*نتیجهگیری:* در این کار روشی ساده، ارزان، حساس، دقیق، ایمن، با حداقل امکانات آزمایشگاهی و حداقل میزان حلال آلی تحت عنوان SHS-LLME-HPLC برای شناسایی و تعیین مقدار داروهای مورد نظر در نمونه های پلاسما طراحی شد که با استفاده از این روش میتوان در مراکز درمانی و قانونی داروهای مورد نظر را با دقت و حساسیت بالا در نمونه پلاسما ردیابی و تعیین مقدار کرد.